硝酸汞：中华人民共和国农业农村部公告第355号 2024-02-20 04:35:18 0 0 根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定，经审查，批准阿金塔-邓地有限公司生产的莫奈太尔内服溶液在我国注册，核发《进口兽药注册证书》，并发布产品质量标准、说明书、标签，以及莫奈太尔每日允许摄入量（ADI）、最高残留限量标准（MRLs）（试行）和残留检测方法标准（试行），自发布之日起执行。 批准世德来有限公司等4家公司生产的葡萄糖酸氯己定溶液（泌乳期）等4种兽药在我国再注册，核发《进口兽药注册证书》，并发布修订后的产品质量标准、说明书、标签，自发布之日起执行。此前发布的该产品兽药质量标准、说明书和标签同时废止。 批准意大利豪普特制药厂生产的复方阿莫西林乳房注入剂（泌乳期）在我国再注册，核发《进口兽药注册证书》，并发布修订后的产品质量标准、说明书、标签以及泼尼松龙每日允许摄入量（ADI）、最高残留限量标准（MRLs）（试行）和克拉维酸、泼尼松龙残留检测方法标准（试行）。此前发布的该产品兽药质量标准、说明书和标签同时废止。 批准硕腾公司美国查理斯堡生产厂等2家公司生产的猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株，I）等2种兽药在我国变更注册，并发布变更后的产品质量标准、说明书和内包装标签，自发布之日起执行。此前发布的该产品兽药质量标准、说明书和标签同时废止。 批准Lusomedicamenta药业技术有限公司等3家公司生产的地克珠利混悬液等3种兽药产品在我国变更注册。 特此公告。 附件: 1.进口兽药注册目录 2.质量标准 3.说明书和标签 4.莫奈太尔每日允许摄入量（ADI）、最高残留限量标准（MRLs）（试行）和残留检测方法标准（试行） 5.泼尼松龙每日允许摄入量（ADI）、最高残留限量标准（MRLs）（试行）和克拉维酸、泼尼松龙残留检测方法标准（试行） 农业农村部 2020年11月9日 附件1 进口兽药注册目录 兽药名称 生产厂名称 国 别 进口兽药 注册 证书号 有效期限 备注 莫奈太尔内服溶液 Monepantel Oral Solution 阿金塔-邓地有限公司 Argenta Dundee Limited 英国 （2020） 外兽药证字54号 2020.11.9 — 2025.11.8 注册 葡萄糖酸氯己定溶液（泌乳期） Chlorhexidine Gluconate solution (Lactating Cow) 世德来有限公司 CID LINES NV 比利时 （2020） 外兽药证字55号 2020.11.9 — 2025.11.8 再注册 双甲脒溶液 Amitraz Solution 英特威国际有限公司法国生产厂 Intervet Productions 法国 （2020） 外兽药证字56号 2020.11.9 — 2025.11.8 再注册 种鸡球虫活疫苗 Coccidiosis Vaccine ,Live Oocysts 英特威美国分公司 Intervet Inc. 美国 （2020） 外兽药证字57号 2020.11.9 — 2025.11.8 再注册 种鸡新城疫灭活疫苗（La Sota株） Newcastle Disease Vaccine， Inactived(Strain La Sota) 匈牙利诗华-费拉西亚兽医生物制品有限公司 CEVA-PHYLAXIA Veterinary Biologicals Co. Ltd. 匈牙利 （2020） 外兽药证字58号 2020.11.9 — 2025.11.8 再注册 复方阿莫西林乳房注入剂（泌乳期） Compound Amoxicillin Intramammary Infusion (Lactating Cow) 意大利豪普特制药厂 HauptPharma Latina s.r.l. 意大利 （2020） 外兽药证字59号 2020.11.9 — 2025.11.8 再注册 猪支原体肺炎灭活疫苗 （P-5722-3株，I） Mycoplasma HyopneumoniaeBacterin 硕腾公司美国查理斯堡生产厂 Zoetis Inc. 美国 (2018) 外兽药证字40号 2018.10.18 — 2023.10.17 变更注册： 变更质量标准 犬细小病毒病活疫苗 （NL-35-D株） Parvovirus Vaccine，Live （Strain NL-35-D） 硕腾公司美国林肯厂 Zoetis Inc.， Lincoln， USA 美国 （2020） 外兽药证字11号 2016.04.20 — 2021.04.19 变更注册：变更质量标准、说明书和内包装标签 地克珠利混悬液 Diclazuril Suspension Lusomedicamenta药业技术有限公司 Lusomedicamenta-Technical Pharmaceutical Society.， A.S. 葡萄牙 （2020） 外兽药证字51号 2020.10.14 — 2025.10.13 变更注册：变更企业名称为美国礼蓝动物保健有限公司 Elanco Animal Health Incorporated 副猪嗜血杆菌病灭活疫苗（12型Z-1517株） Glaesserella parasuis Vaccine，Inactivated （Serotype 12 Strain Z-1517） 勃林格殷格翰动物保健（美国）有限公司 （St.Joseph生产厂） Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. 美国 （2020） 外兽药证字43号 2020.09.07 — 2025.09.06 变更注册：按照国际最新分类学，更新副猪嗜血杆菌的英文名称。由 Haemophilus parasuis 变更为 Glaesserella parasuis 氯前列醇钠 注射液 Cloprostenol Sodium Injection 礼蓝新西兰 Elanco New Zealand 新西兰 （2018） 外兽药证字06号 2018.02.11 — 2023.02.10 变更注册：变更企业名称及生产厂名称为礼蓝新西兰 Elanco New Zealand 附件2 莫奈太尔内服溶液等8种兽药产品质量标准 一、莫奈太尔内服溶液质量标准 莫奈太尔内服溶液 Monaitaier Neifurongye Monepantel Oral Solution 本品含莫奈太尔（C20H13F6N3O2S）应为标示量的93.0%～105.0%。 【性状】 本品为黄色至橙色澄清液体。 【鉴别】 （1） 取本品约0.8g，加甲醇10ml溶解，混匀，作为供试品溶液。另取莫奈太尔对照品20mg，加甲醇10ml溶解，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录0502）试验，吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸（33∶5∶2）为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。 （2） 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 【检查】 β-胡萝卜素 取本品8.5g，加乙醇50ml溶解，超声处理15分钟，作为供试品溶液；另取30% β-胡萝卜素对照品0.1g，加乙醇100ml溶解，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录0502）试验，吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以异丙醇-乙酸乙酯-水-浓氨溶液-三乙胺（21∶3∶6∶3∶3）为展开剂，展开后，晾干，直接检视。供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。 α-生育酚 照高效液相色谱法（附录0512）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（YMC-Pack ODS AQ，3.0mm× 150mm，5μm或效能相当的色谱柱）；以四氢呋喃-乙腈-0.05%磷酸溶液（41∶27∶32）为流动相，柱温为70℃，流速为每分钟1.0ml，检测波长为294nm。取对照品溶液20µl，注入液相色谱仪，记录色谱图，α-生育酚保留时间约为8.7分钟；拖尾因子按α-生育酚峰计算应为0.8～1.5。连续进样6次，α-生育酚峰面积的相对标准偏差应不大于2.0%。 测定法 取本品约10g（相当于α-生育酚5mg），精密称定，置50ml量瓶中，加乙腈30ml，超声20分钟使溶解，用乙腈稀释至刻度，滤过，作为供试品溶液。另取α-生育酚对照品约50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加乙腈80ml，超声20分钟使溶解，用乙腈稀释至刻度；精密量取10ml，置50ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度，滤过，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液和对照品溶液各20µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。同时测定本品的相对密度，将供试品量换算成毫升数，按外标法以峰面积计算，α-生育酚含量应为0.05 mg/ml～0.55mg/ml。 有关物质 含量测定项下供试品溶液的色谱图中如有降解产物峰（相对于莫奈太尔主峰的保留时间分别为0.76～0.77、0.82～0.83、0.87），按下式计算，含单个降解产物的量不得过莫奈太尔标示量的1.0%，各降解产物的和不得过莫奈太尔标示量的2.5%。供试品溶液色谱图中小于莫奈太尔标示量0.05%的色谱峰可忽略不计。 单个降解产物 = P × C Pt 式中 P为供试品溶液色谱图中单个降解产物的峰面积； Pt为供试品溶液色谱图中莫奈太尔的峰面积； C为含量测定项下测得的莫奈太尔含量占标示量的百分比。 微生物限度 取本品，照非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法（附录1105）和控制菌检查法（附录1106）及非无菌兽药微生物限度标准（附录1107）检查，每1ml供试品中需氧菌总数不得过102cfu，霉菌和酵母菌总数不得过101cfu，不得检出大肠埃希菌。 其他 应符合内服溶液剂项下有关的各项规定（附录0111）。 【含量测定】 照高效液相色谱法（附录0512）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（YMC Pack Pro C18，4.6mm ×150mm，3μm或效能相当的色谱柱）；以0.05%磷酸溶液为流动相A；以0.05%磷酸乙腈溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱；流速为每分钟1.0ml；检测波长为225nm；柱温为30℃。取对照品溶液10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。莫奈太尔峰的保留时间约为21分钟；拖尾因子按莫奈太尔峰计算应为0.8～1.5。连续进样6次，莫奈太尔峰面积的相对标准偏差应不大于2.0%。 时间（分钟） 流动相A（%） 流动相B（%） 0 70 30 30 5 95 60 5 95 60.1 70 30 67 70 30 测定法 取本品1.0g（相当于莫奈太尔25mg），精密称定，置100ml量瓶中，加0.05%磷酸乙腈溶液80ml，超声15分钟使溶解，并用0.05%磷酸乙腈溶液稀释至刻度，滤过，作为供试品溶液；另取莫奈太尔对照品50mg，精密称定，置200ml量瓶中，加0.05%磷酸乙腈溶液150ml，超声15分钟使溶解，并用0.05%磷酸乙腈溶液稀释至刻度，滤过，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液和对照品溶液各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。同时测定本品的相对密度，将供试品量换算成毫升数，按外标法以峰面积计算，即得。 【作用与用途】 抗蠕虫药。用于治疗和控制绵羊胃肠线虫感染。 【用法与用量】 以莫奈太尔计。内服：一次量，每1kg体重，绵羊2.5mg（相当于本品每10kg体重1ml）。本品为单次给药。根据不同地区疫情流行情况，可以重复给药。具体给药剂量见下表： 体重（kg） 剂量（ml） 10～15 1.5 16～20 2 21～25 2.5 26～30 3 31～35 3.5 36～40 4 41～50 5 51～60 6 61～70 7 >70kg 每增加10kg增加给药1ml 【不良反应】 按推荐的用法用量使用，暂未见不良反应。 【注意事项】 1. 本品可用于繁殖绵羊，包括怀孕和哺乳母羊。 2. 可能生产供人类食用乳品的母羊禁用。 3. 本品对体重不足10kg绵羊的疗效尚不明确，对体重不足10kg或不足2周龄绵羊的安全性尚不明确。 4. 为确保精确给药，应尽可能准确称量动物体重。给药前，检查给药器具的准确度和正常运行情况。 5. 如群体给药，应根据动物体重分组，并按组内动物最大体重确定给药量，以避免药量不足。使用后清洗给药设备。 6. 为避免因产生耐药性影响疗效，应避免以下操作：在持续一段时间内，过度频繁和重复使用同类抗蠕虫药；因体重估计不准确或未校准剂量给药器具导致给药不足。建议一年内使用本品不超过两次。 7. 切勿在标签标注的有效期后使用。一旦开封，请在1年内使用。 8. 由于缺乏相容性研究，本品不得与其他兽药混合使用。 9. 处理本品时请勿进食、饮水或吸烟；应佩戴个人防护装备，包括手套。处理后，应洗手和接触过本品的皮肤。 10. 当皮肤或眼睛意外接触本品时，应立即用水清洗。脱去所有污染衣物。如果误食，应立即就医，并向医生出示包装说明书或标签。 11. 按照当地有关规定处理未使用的兽药或兽药使用过程中产生的废弃物。 12. 置于儿童视线和接触范围之外。 【休药期】 绵羊9日。 【规格】 2.5% 【包装】 【贮藏】 密闭保存。 【有效期】 24个月。 【生产企业】 阿金塔-邓地有限公司（Argenta Dundee Limited） 二、葡萄糖酸氯己定溶液（泌乳期）质量标准 葡萄糖酸氯己定溶液（泌乳期） Putaotangsuan Lüjiding Rongye（miruqi） Chlorhexidine Gluconate solution(Lactating Cow) 本品由20%葡萄糖酸氯己定溶液，加适量的异丙醇、甘油等制成的溶液，含葡萄糖酸氯己定（C22H30Cl2N10·2C6H12O7）应为标示量的90.0%～105.0%。 【性状】 本品为深蓝色粘稠液体，有薄荷香味。 【鉴别】 （1）取本品2ml，加热1%溴化十六烷基三甲铵溶液5ml，加溴试液与氢氧化钠试液各1ml，即显深红色。 （2）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 【检查】 相对密度 本品的相对密度（附录0601）应为0.980～1.020。 pH值 应为4.5～5.5（附录0631）。 黏度 取本品，依法测定（附录0633第二法），动力黏度应为2600～3400mpa.s。 对氯苯胺 取本品3.33g，精密称定，加水10ml与2mol/L盐酸溶液20ml，依次加10%亚硝酸钠溶液0.35ml与5%氨基磺酸铵溶液2ml，摇匀，放置5分钟，加0.1%二盐酸萘基乙二胺溶液5ml与乙醇1ml，再加水适量稀释至50ml，摇匀，放置30分钟，如显色，与对氯苯胺溶液（取对氯苯胺50.0mg，精密称定，置100ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置100ml量瓶中，用0.1mol/L盐酸稀释至刻度，摇匀）10.0ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.003%）。 有关物质 在含量测定项下的供试品溶液色谱图中，除相对保留时间小于0.25的色谱峰和辅料峰（相对保留时间约为0.9）外，杂质A和杂质B峰面积（相对保留时间分别约为0.7和0.8）均不得过主峰面积的1.0%，其他单个杂质峰面积不得过主峰面积的1.0%，总杂质峰面积不得过3.0%。 微生物限度 取本品10ml，加无菌氯化钠‐蛋白胨缓冲液（pH7.0）至100ml，依法检查（附录1105），应<102cfu/ml。 其他 应符合外用液体制剂项下有关的各项规定（附录0114）。 【含量测定】 照高效液相色谱法（附录0512）测定。 色谱条件与系统适用性试验 采用Waters Acquity UPLC或相似的超高效液相色谱仪配备PDA检测器。用Acquity UPLC BEH C18（100mmx2.1mm，1.7µm）或等效超高效色谱柱，以庚烷磺酸钠溶液（取庚烷磺酸钠4.0g，加入醋酸20ml，加水400ml使溶解，摇匀）-甲醇（20:80）为流动相；检测波长254nm，流速为每分钟0.4ml，柱温35℃。 测定法 取本品约2.0g，精密称定，置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml，置10ml量瓶中，用1%醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取3μl，注入超高效液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间3倍。另取醋酸氯己定对照品约0.185g，精密称定，置100ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置50ml量瓶中，用1%醋酸溶液-甲醇（50∶50）稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，精密量取3μl,注入超高效液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，并将结果乘以1.4352，即得。 【作用与用途】 消毒防腐药。用于奶牛乳头消毒和预防泌乳奶牛乳房炎。 【用法与用量】 取本品至少5ml置乳头浸润杯内，挤奶后立即将奶牛乳头浸入溶液中，确保乳头至少浸入3/4长度，使用过程中按需要适量添加。同一浸润杯如在不同奶牛间使用，应更换杯内产品。如果浸润杯被污染，应清洗后再用。1日2次。 【不良反应】 按推荐剂量使用，未见不良反应。 【注意事项】 1.本品仅供外用。 2.奶牛乳头皮肤完好时才可使用本品，奶牛乳头皮肤出现损伤时暂停使用。 3.挤奶前，应清洗奶牛乳房和乳头并擦干，有机物（脓汁、血液等）存在会降低本品功效。 4.如果户外温度低于冰点，使用本品后，在奶牛乳头干燥前勿将奶牛驱至室外。 5.使用本品后，应在乳头干燥后方可将奶牛置于湿（下雨）、冷和有风的环境中。 6.瓶子开启后6个月内有效，未用完部分应废弃。 7.避免霜冻，若发生结冰，应将产品至温暖地方解冻，并用前摇匀。倒入浸润杯里的溶液，请勿倒回原包装瓶内。 8.阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂或无机阴离子可使本品失去活性，勿将本品与自来水、其它化学品、消毒剂或其它用于乳头、乳房护理的产品混用，勿使用本品清洗或消毒挤奶设备。 9.使用本品过程中，避免接触眼睛。若溅入眼睛，请用大量水先冲洗并就医，若误食本品，需大量饮水并就医，使用本品后，请洗手。 10.对氯己定过敏者及儿童勿接触本品。 11.本品对鱼和其它水生生物有害，勿直接排入环境水系中。 【休药期】 牛0日；弃奶期0小时。 【规格】 0.5% 【包装】 1L 5L 10L 20L 25L 60L 200L 【贮藏】 遮光，密封，在干燥处保存。 【有效期】 18个月。 【生产企业】 世德来有限公司（CID LINES NV） 附注 如稀释后的本品还有抗菌活性，应使用以下含中和剂的培养基。每升中和剂含酪蛋白胰酶消化物5.0g、酵母提取物2.5g、右旋葡萄糖10.0g、巯基乙酸钠1.0g、硫代硫酸钠6.0g、亚硫酸氢钠2.5g、聚山梨醇酯80(吐温80)5.0g、卵磷脂7.0g、溴甲酚紫0.02g。添加1%中和剂至细菌或真菌培养基中。 三、双甲脒溶液质量标准 双甲脒溶液 Shuangjiami Rongye Amitraz Solution 本品为双甲脒加适宜的乳化剂和溶剂等制成。含双甲脒（C19H23N3）应为标示量的90.0%～110.0%。 【性状】 本品为微黄色澄清液体。 【鉴别】 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 【检查】 乳化性 取本品5ml，依法检查（附录0911），应符合规定。 有关物质 取本品，加乙酸乙酯稀释制成每1ml中约含双甲脒0.1g的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加乙酸乙酯定量稀释制成每1ml中约含双甲脒0.5mg的溶液，作为对照溶液；取2,4-二甲基苯胺对照品适量，加乙酸乙酯溶解并稀释制成每1ml中约含0.3mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录0502）试验，分别吸取供试品溶液、对照溶液与对照品溶液各2µl，分别点于同一高效硅胶GF254薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-三乙胺（5∶3∶2）为展开剂，展开。晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品溶液如显与对照品溶液位置相同的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深（0.3%）；供试品溶液如显其他杂质斑点，除Rf值0.3以下的杂质斑点外，单个杂质斑点颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深（2.0%）；杂质斑点的个数不得过4个，其总量不得过5.0%。 水分 取本品，照水分测定法（附录0832第一法A）测定，含水分不得过0.15%。 其他 应符合外用液体制剂项下有关的各项规定（附录0114）。 【含量测定】 取本品适量（约相当于双甲脒50mg），精密称定，置10ml量瓶中，照双甲脒项下的方法，精密加入内标溶液5ml，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀。取1～3µl，注入气相色谱仪，并依法测定校正因子；另取本品，同时测定相对密度（附录0601），将供试品的量换算成毫升数，计算，即得。 【作用与用途】 广谱杀寄生虫药。用于治疗和控制牛、羊、猪体外寄生虫。主用于杀螨；也可用于杀蜱、虱等外寄生虫。 【用法与用量】 牛、羊：喷洒或药浴；猪，喷洒。加清水配至所需浓度，现用现配。 喷洒给药 以双甲脒计：牛，0.025%，喷洒至动物全身皮肤完全浸透；整群治疗，虱、螨严重感染病例，应在7～10天后进行二次喷洒。羊，0.05%，喷洒至动物全身皮肤完全浸透。猪，0.05%，喷洒至动物全身皮肤完全浸透，特别是耳廓、四肢内侧；建议全群喷洒，7～10天后可进行二次喷洒；常规性治疗方案为：应每2～3个月定期喷洒公猪给药；在母猪转移至产仔舍时、小猪断奶后或转入育肥舍前、新增入群猪只在混群前进行喷洒给药。 药浴给药 以双甲脒计：羊，0.05%，使羊在药液中浸泡约30秒，头部至少浸没一次。 【不良反应】 按推荐剂量使用，无不良反应。如意外发生给药过量事件，有可能会出现中枢神经系统抑郁，如嗜睡、镇静、共济失调、消化紊乱伴随厌食。通常可自然恢复，无需临床治疗。如有必要，可进行辅助治疗直到症状消失。 【注意事项】 1. 马属动物对双甲脒敏感，慎用。 2. 对鱼类有剧毒，不能将药物或容器弃于池塘或河流。 3. 禁用于产奶羊和水生食品动物。 4. 本品对皮肤和眼睛有刺激作用，使用时防止药液沾污皮肤和眼睛。 5. 本品仅供外用。 6. 避免儿童接触本品。 【休药期】 牛、羊21日；猪8日；弃奶期48小时。 【规格】 12.5% 【包装】 （1）1升/瓶 （2）5升/瓶 （3）20升/瓶 【贮藏】 遮光，密封保存。 【有效期】 48个月。 【生产企业】 英特威国际有限公司法国生产厂（Intervet Productions）。 地址：Rue De Lyons, 27460 Igoville, France 四、种鸡球虫活疫苗质量标准 种鸡球虫活疫苗 Zhongji Qiuchong Huoyimiao Coccidiosis Vaccine , Live Oocysts 本品系用巨型、变位、布氏、堆型、柔嫩、早熟、毒害、哈氏艾美耳球虫虫种分别接种鸡，收获卵囊，加入重铬酸钾溶液混合制成。用于预防种鸡球虫病。 【性状】 黄色至棕色悬液。 【无菌检验】 按现行《中国兽药典》三部附录进行检验，应无菌生长。 【安全检验】 取1～14日龄SPF鸡25只，分别口服接种疫苗2羽份，平养，观察21日。如出现严重的球虫病症状或死亡，记作“失败”。如第一次检验中有3只鸡记作“失败”，则需进行第二次检验。第二次检验中取鸡50只。最终判定如下表所示： 检验次数 检验鸡数 允许的失败鸡数 合格产品 不合格产品 1 25 ≤2 ≥4 2 50 ≤5 ≥6 【效力检验】 取1～14日龄SPF鸡120只，其中70只分别饮水接种疫苗1羽份，另50只不接种作为对照。接种后14日内，垫料需保持一定湿度。接种后28日，随机选取上述免疫鸡和对照鸡各40只，分成8组（每组5只免疫鸡和5只对照鸡），每组以一种艾美耳球虫卵囊悬液1.0ml口服攻虫。各虫种的攻虫量至少为∶巨型艾美耳球虫45000个卵囊、变位艾美耳球虫300000个卵囊、布氏艾美耳球虫60000个卵囊、堆型艾美耳球虫300000个卵囊、柔嫩艾美耳球虫20000个卵囊、早熟艾美耳球虫300000个卵囊、毒害艾美耳球虫42000个卵囊、哈氏艾美耳球虫300000个卵囊。 攻虫后5～6日，扑杀所有鸡，检查小肠及盲肠病变，并记分（病变计分标准见附注）。所有免疫鸡的病变记分为均应≤1，每组对照鸡中应至少有4只鸡的病变记分为2～4分。 【作用与用途】 用于预防种鸡球虫病。 【用法与用量】 用于4日龄种鸡喷料接种。按瓶签注明羽份稀释，每只1羽份。喷料方法∶每1000羽份兑蒸馏水400ml，均匀喷于饲料表面，供自由采食。 【注意事项】 （1） 仅用于接种平养的健康后备种鸡。 （2） 接种前、后24小时内，不得使用抗球虫药和消毒剂。 （3） 接种后，应保持鸡舍垫料具有一定湿度。 （4） 疫苗一旦开启，应一次用完。 （5） 用过的疫苗瓶和稀释后剩余的疫苗应焚毁。 （6） 屠宰前21日内禁用。 【规格】 （1）4ml（1000羽份）/瓶 （2）10ml（5000羽份） 【贮藏与有效期】 2～8℃避光保存，有效期为12个月。 【生产企业】 英特威美国分公司 （Intervet Inc.） 地址 ROUTE 411 West Delaware Avenue, Millsboro, Delaware 19966 附注：病变记分标准 球虫种 1分 2分 3分 4分 堆型艾美耳球虫 十二指肠有小淤血点 十二指肠和小肠前半段有白色病变 在小肠前半段有白色病变；水肿 出血；白色病变；融合；死亡 布氏艾美耳球虫 十二指肠后半段有小淤血点 浓稠粘液；小肠后半段肠壁增厚 小肠后半段肠壁膨胀；内容物血染 内容物血染；小肠后半段严重膨胀；伴有粘膜出血；死亡 哈氏艾美耳球虫 小肠有小淤血点 小肠壁轻度出血 小肠前段和中段肠壁红肿严重 小肠前段和中段极度水肿；死亡 巨型艾美耳球虫 整个小肠段有小淤血点 桔黄色粘液；整个小肠壁增厚 小肠壁膨胀 小肠极度膨胀，伴有粘膜出血；死亡 变位艾美耳球虫 整个小肠段有小淤血点，特别是前1/2段 整个小肠有白色病变，特别是前半段 整个小肠有白色病变和水肿，特别是前半段 白色出血性病变；融合；死亡 毒害艾美耳球虫 小肠中段很少有小淤血点 有很多小淤血点 小肠中段轻微水肿并有小淤血点；小的白色病变 小肠中段严重水肿并有出血；小的白色病变；死亡 早熟艾美耳球虫 小肠前半段肠壁稍增厚 小肠前半段肠壁增厚 小肠前半段肠壁增厚，粉红色 小肠前半段浅白色；死亡 柔嫩艾美耳球虫 很少有小淤血点 小肠有小淤血点；盲肠壁增厚 盲肠内轻度出血 盲肠壁变薄，盲肠内充满血液或肠芯 五、种鸡新城疫灭活疫苗（La Sota株）质量标准 种鸡新城疫灭活疫苗（La Sota株） Zhongji Xinchengyi Miehuoyimiao（La Sota Zhu） Newcastle Disease Vaccine，Inactivated（Strain La Sota） 本品系用鸡新城疫病毒La Sota株接种易感鸡胚培养，收获感染鸡胚尿囊液，经乙烯亚胺灭活并用甲醛溶液处理后，加矿物油佐剂混合乳化制成。用于预防种鸡新城疫。 【性状】 外观 乳白色均匀乳剂。 剂型 油包水型。取2支试管，分别加入去离子水和Marcol 52油5ml，分别在水和油的表面滴加0.5ml待检疫苗，轻轻振摇。疫苗应与Marcol 52油均匀混合，而不与去离子水混合。如果不能明确确定是否混合，应另取疫苗进行导电性测定，其导电性应低于5μS。 稳定性 取3支大小适宜的离心管，分别加入待检疫苗8ml，以3000r/min离心30分钟。3支离心管中的疫苗均应不分层。 黏度 按现行《中国兽药典》附录中旋转式粘度计测定法进行测定，动力粘度应不超过200mPa•s。 【装量检查】 按现行《中国兽药典》三部附录进行检验，应为标示量的100%～110％。 【无菌检验】 按现行《中国兽药典》三部附录进行检验，应无菌生长。 【安全检验】 用2～4周龄SPF雏鸡10只，各颈部皮下注射疫苗1ml（2羽份），观察21日，应不出现由疫苗引起的局部或全身不良反应。 【灭活检验】 用9～11日龄SPF鸡胚10枚，各尿囊腔接种疫苗0.2ml（2/5羽份），37℃孵育7日。取出接种后24小时内死亡的鸡胚，进行新城疫病毒检测，如出现新城疫病毒，则判疫苗不合格。 分别收集接种24小时后死亡鸡胚的尿囊液和接种后7日活胚的尿囊液。取9～11日龄SPF鸡胚10枚，分别尿囊腔接种上述活胚尿囊液的混合物0.2 ml，另取鸡胚10枚，分别尿囊腔接种上述死胚尿囊液的混合物0.2 ml，继续孵化5～6日。取鸡胚尿囊液，用鸡红细胞进行HA检测。 如果尿囊液无HA活性，且在任一阶段检验中死亡的鸡胚不超过20％，则判疫苗合格。如果在某一阶段中死亡的鸡胚超过20％，则应重复该阶段的检验。重检后，如果尿囊液无HA活性，且在该检验中死亡的鸡胚不超过20％，则判疫苗合格。 可以在检验中使用抗生素，以控制细菌污染。 【效力检验】 下列方法任择其一。 （1）血清学方法 用4周龄SPF鸡20只，各肌肉注射疫苗1/50羽份，另取10只鸡，不接种，作为对照。接种后21日，所有鸡分别采血，分离血清，进行血凝抑制（HI）抗体效价测定。免疫组的HI抗体效价几何平均值应不低于1∶16，对照组的HI抗体效价均应不高于1∶4。 （2）免疫攻毒法 用4周龄SPF鸡60只，分3组，每组20只，分别肌肉注射疫苗20μl （1/25羽份）、10μl（1/50羽份）和5μl（1/100羽份）。另取SPF鸡10只，不接种，作为对照。接种后21日，每只鸡肌肉注射鸡新城疫病毒强毒0.5ml。观察21日，对照鸡应全部死亡，计算PD50，每羽份疫苗应至少含50PD50。 【甲醛、汞类防腐剂残留量测定】 按现行《中国兽药典》附录进行测定，甲醛残留量应不超过150μg/ml（0.015%），汞类防腐剂残留量应不超过90μg/ml（0.009%）。 【作用与用途】 用于预防种鸡新城疫。 【用法与用量】 皮下或肌肉注射，每只0.5ml。在后备蛋鸡或种鸡开产前3～4周即16～20周龄时接种。 【注意事项】 （1）仅用于接种健康鸡。 （2）使用前应将疫苗在室温（15～25℃）下放置3～4小时。 （3）使用前和使用过程中应充分振摇疫苗瓶。 （4）疫苗一旦开启，应在24小时内用完。 （5）接种时应采用常规无菌操作。 （6）不要与其他疫苗或药物混合使用。 （7）用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应进行无害化处理。 （8）注射部位可能会出现轻度肿胀，一般在2～3周内自行消失。 【规格】 （1）250ml（500羽份）/瓶 （2）500ml（1000羽份）/瓶 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为24个月。 【生产企业】 匈牙利诗华—费拉西亚兽医生物制品有限公司（CEVA-PHYLAXIA Veterinary Biologicals Co. Ltd.） 六、复方阿莫西林乳房注入剂（泌乳期）质量标准 复方阿莫西林乳房注入剂（泌乳期） Fufang Amoxilin Rufangzhuruji（Miruqi） Compound Amoxicillin Intramammary Infusion (Lactating Cow) 本品为阿莫西林、克拉维酸钾、泼尼松龙与矿物油制成的供乳房灌注用灭菌油性混悬溶液。含阿莫西林（C16H19N3O5S）应为标示量的90.0%～105.0%，含克拉维酸钾以克拉维酸（C8H9NO5）计应为标示量的90.0%~120.0%，含泼尼松龙（C21H28O5）应为标示量的90.0%~108.0%。 【性状】 本品为白色至类白色油状混悬液。 【鉴别】 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应分别与阿莫西林、克拉维酸、泼尼松龙对照品溶液主峰的保留时间一致。 【检查】 阿莫西林降解物 取本品2支，挤出内容物，混匀，取约750mg（相当于阿莫西林50mg），精密称定，置50ml离心管中，加环己烷25ml，超声，离心10分钟（每分钟3500转），弃去上清液，重复提取1次，剩余物在室温下挥发至干。加硼酸缓冲液（取硼酸6.0g，加水900ml 使溶解，用1mol/L 氢氧化钠溶液调节pH值至9.0±0.1，用水稀释至1000ml）25ml溶解，转移至烧杯中，加醋酐乙腈溶液（取醋酐5ml，加乙腈至100ml）2ml，搅拌3分钟，再加入醋酸-醋酸钠缓冲液（pH4.6）20ml，照电位滴定法（附录0701），用铂电极为指示电极，汞-硫酸亚汞电极为参比电极，立即用硝酸汞滴定液（0.02mol/L）滴定，滴定应在3分钟内完成。每1ml硝酸汞滴定液（0.02mol/L）相当于7.308mg的阿莫西林降解物（按C16H19N3O5S计算），含阿莫西林降解物的量应不得过阿莫西林量的17.5%。 水分 取本品2支，挤出内容物，混匀，精密称取适量，以无水甲醇-氯仿（30∶70）为溶剂，照水分测定法（附录0832第一法A）测定，含水分不得过2.5%。 无菌 取本品，挤出内容物，混匀，取1.0g，转移至100ml含0.1%聚乙二醇或1%吐温-80 的0.1%中性酪蛋白胨灭菌溶液（酪蛋白胨1g，加水1000ml，加热溶解，调节pH值至7.6，滤过，分装，灭菌）中，用上述灭菌溶液为冲洗液，照薄膜过滤法（附录1101）处理后，依法检查，应符合规定。 装量 取本品10支，照最低装量检查法（附录0942重量法）检查，平均装量与标示装量的偏差应小于10%。 【含量测定】 阿莫西林和克拉维酸 照高效液相色谱法（附录0512）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1mol/L磷酸盐缓冲液（取无水磷酸二氢钠15.60g，加水至1000ml，用磷酸调节pH值至4.0）-甲醇（95∶5）为流动相；流速为每分钟2ml；检测波长为216nm。理论板数按克拉维酸峰计算不低于1500，阿莫西林峰、克拉维酸峰与杂质峰分离度应符合要求。 测定法 取混合均匀的供试品约0.5g，精密称定，置150ml具塞锥型瓶中，加水100ml，剧烈振摇15分钟，将内容物转入1000ml 量瓶中，用水冲洗锥型瓶及瓶塞，洗液并入量瓶中，用水稀释至刻度，超声5分钟，滤过。精密量取续滤液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿莫西林对照品和克拉维酸对照品适量，用水定量稀释制成每1ml 中含阿莫西林33μg和克拉维酸8μg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。 泼尼松龙 照高效液相色谱法（附录0512）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1mol/L 醋酸铵溶液-乙腈（700∶300）为流动相；流速为每分钟2ml；检测波长为240nm。理论板数按泼尼松龙峰计算不低于1000，泼尼松龙峰与杂质峰分离度应符合要求。 测定法 取混合均匀的供试品约0.5g，精密称定，置50ml离心管中，加环己烷30ml，超声5分钟，离心10分钟（每分钟3500转），弃去上清液，重复提取1次，剩余物在室温下挥发至干。加50%乙醇溶液适量使溶解，转移至200ml量瓶中，用50%乙醇溶液稀释至刻度，超声10分钟，滤过。精密量取续滤液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取泼尼松龙对照品约44mg，精密称定，置500ml量瓶中，用50%乙醇溶液溶解并稀释至刻度，精密量取该溶液10ml，置100ml量瓶中，用50%乙醇溶液稀释至刻度,同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。 【作用与用途】 抗生素类药。主要用于治疗革兰氏阳性菌和阴性菌引起的奶牛泌乳期乳房炎。 【用法与用量】 乳管注入：泌乳期奶牛，挤奶后每乳室1支，每日2次，连用3次。 【不良反应】 按推荐剂量使用，暂未见不良反应。 【注意事项】1. 仅供泌乳期奶牛乳房炎使用。 2. 对青霉素过敏者不要接触本品。使用人员应避免直接接触产品中的药物，用后洗手。如出现皮肤起红疹，应马上请医生诊治；脸、唇和眼肿胀或呼吸困难为严重过敏表现，急需医疗救护。 3. 置于儿童无法触及处。 【休药期】 牛7日；弃奶期60小时。 【规格】 3g∶阿莫西林0.2g（以C16H19N3O5S计）+克拉维酸钾50mg（以C8H9NO5计）+泼尼松龙10mg 【包装】 【贮藏】 25℃以下，密闭保存。 【有效期】 18个月。 【生产企业】 意大利豪普特制药厂（Haupt Pharma Latina s.r.l.） 地址：SS 156 Km 47,600-04100 Borgo San Michele, Latina, Italy 七、猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株,Ⅰ）质量标准 猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株,Ⅰ） Zhu Zhiyuantifeiyan Miehuoyimiao（P-5722-3 Zhu,I） Mycoplasma Hyopneumoniae Bacterin 本品系用猪肺炎支原体P-5722-3株接种适宜的培养基培养，收获培养物，经二乙烯亚胺（BEI）灭活后，加入适宜佐剂制成。用于预防猪支原体肺炎。 【性状】灰白色至浅褐色乳剂。 【装量检查】按现行《中国兽药典》三部附录进行检验，应符合规定。 【无菌检验】按现行《中国兽药典》三部附录进行检验，应无菌生长。 【安全检验】（1）用小鼠检验 用6～7周龄的健康小鼠8只，各皮下注射疫苗0.5ml，连续观察7日，应不出现因疫苗接种引起的不良反应。 （2）用猪检验 用3～6周龄的健康猪2头，每头猪颈部肌肉注射疫苗4ml（含2头份），每侧注射2ml。连续14日观察局部和全身反应，若14日内未出现不良反应，注射部位可能出现微小的肿胀但在14日内消退，判为合格。 【效力检验】按附注1方法测定猪支原体肺炎灭活疫苗的效力。产品有效期内RP值应≥1.0。 【汞类防腐剂残留量测定】 按现行《中国兽药典》附录或附注2方法进行检验，应不超过0.010%。 【作用与用途】用于预防猪支原体肺炎。 【用法与用量】肌肉注射。3周龄以上的健康猪，每头2 ml。种猪：易感猪或免疫状况不明的猪在引入畜舍前应接种一次。以后每半年加强接种一次。 【注意事项】（1）仅用于接种健康猪。 （2）开封后一次用完。 （3）避免冻结。 （4）用前摇匀。 （5）疫苗中含有青霉素和硫柳汞作为防腐剂。 （6）用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应进行无害化处理。 （7）屠宰前21日内禁止使用。 （8）一般无肉眼可见不良反应。极少数情况下会发生过敏反应，如发生，解毒剂为肾上腺素。 【规格】（1）10头份/瓶（2）50头份/瓶（3）125头份/瓶（4）250头份/瓶（5）500头份/瓶 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为24个月。 【生产企业】硕腾公司美国查理斯堡生产厂（Zoetis Inc.） 附注： 1 效力检验方法 – p46 蛋白酶联免疫吸附试验 1.1材料 1.1.1设备 1.1.1.1 96孔平底酶联反应板 1.1.1.2 封板膜 1.1.1.3 96孔平底转移板 1.1.1.4 酶标仪（双波长） 1.1.1.5 涡旋混合器 1.1.1.6 滴定板洗涤器 1.1.1.7 轨道式震荡器 1.1.1.8 培养箱 35～39℃和21～25℃ 1.1.2 缓冲液 1.1.2.1 包被缓冲液 3.814g四硼酸钠（Na2B4O7·10H2O），用纯水定容至1000ml，使用5mol/L盐酸或5mol/L氢氧化钠调节pH值至9.0～9.2，用0.2µm或更小的滤器过滤除菌。2～8℃保存，3个月内使用。 1.1.2.2 磷酸盐缓冲溶液（PBS，pH值7.1～7.3） 氯化钠 8.5 g 磷酸氢二钠 1.19 g 磷酸二氢钠 0.253 g 纯水 定容至1000 ml 2～8℃保存，30日内使用。 1.1.2.3 洗涤缓冲液（含0.3%吐温20的PBS）取3ml吐温20，溶解于1000ml PBS中，快速混合。15～30℃保存，30日内使用。 1.1.2.4 1%酪蛋白/PBS+0.1%Triton X-100+10%吐温20 酪蛋白 1.00 g PBS 100.00 ml 提前一日制备，在PBS中溶解酪蛋白。40～44℃下搅拌30分钟使酪蛋白充分溶解，停止加热，测量需要的体积，加入下面成分： 1%酪蛋白/PBS 90.00 ml Triton X-100 0.10 ml 吐温20 10.00 ml 缓慢混合至少5分钟，2～8℃保存，14日内使用。 1.1.2.5 稀释液（封闭、抗原和二抗稀释液）含有0.5%胎牛血清的1%酪蛋白/PBS+0.1% TritonX-100 +10%吐温20，现配现用。举例： 1%酪蛋白/PBS+0.1% TritonX-100 +10%吐温20 60 ml 胎牛血清 0.30 ml 1.1.3 试剂 1.1.3.1 捕获抗体 小鼠抗p46单克隆抗体（硕腾公司提供），未稀释保存，分装物保存在-65℃以下，最多允许5次冻融循环。 1.1.3.2 指示抗体 辣根过氧化物酶标记的小鼠抗p46单克隆抗体（硕腾公司提供），未稀释保存，分装物保存在-10℃以下，最多允许5次冻融循环。 1.1.3.3 底物 ABTS过氧化物酶底物系统，试剂A和试剂B，开启后2～8℃保存，12个月内使用。 1.1.3.4 参考疫苗 硕腾公司提供，按照生产大纲生产的经靶动物免疫与攻毒试验证明了其免疫效力的疫苗，-65℃以下保存。 1.1.3.5 空白对照 疫苗硕腾公司提供，供试品疫苗除肺炎支原体抗原以外的部分（硕腾公司提供），2～8℃保存。 1.1.3.6 阳性对照 疫苗硕腾公司提供，储存条件和初始稀释度请见检验报告。阳性对照疫苗的范围是至少12次连续检验得出的平均值±3个标准偏差。 1.2 方法 1.2.1 抗原处理 在试验前，将参考疫苗、阳性对照疫苗和待检疫苗在-65℃以下进行一次不小于16个小时的冻融。在15～30℃融化待检疫苗、参考疫苗和阳性对照疫苗。 1.2.2抗体包被板的制备 1.2.2.1 用包被缓冲液对小鼠抗p46单克隆捕获抗体按说明稀释至最适浓度。 1.2.2.2 在96孔平底酶联反应板的每孔中加入稀释好的捕获抗体100μl。 1.2.2.3 封板，2～8℃保存16～72小时。 1.2.2.4 弃去包被缓冲液，在干毛巾上拍干，每孔加入300μl洗涤缓冲液冲洗3次，最好使用滴定板洗涤器。 1.2.2.5 在酶联反应板的每孔加入稀释液300μl。 1.2.2.6 封板，35～39℃孵育30～60分钟。 1.2.2.7 弃去稀释液，在干毛巾上拍干，每孔加入300μl洗涤缓冲液冲洗3次，最好使用滴定板洗涤器。 1.2.3 ELISA 试验 1.2.3.1 使用稀释液稀释抗原，可调整初始稀释度使其与参考疫苗校正曲线相对应。待检疫苗的初始稀释度为1∶32，参考疫苗的初始稀释度为1∶16，空白对照疫苗的稀释度为1∶16。阳性对照疫苗的初始稀释度请见检验报告。 1.2.3.2 使用稀释液在96孔平底转移板上对参考疫苗、阳性对照疫苗和待检疫苗进行2倍系列稀释。在转移板B行中分别加入稀释好的（初始稀释度）参考疫苗、阳性对照疫苗和待检疫苗（见平板布局图），每孔300μl，在C～G行中加入稀释液，每孔150μl。然后从B行每孔吸取150μl转移至C行，依次向下做2倍系列稀释直至G行，换行时要更换吸头。 1.2.3.3 按平板布局图将转移板上的参考疫苗、阳性对照疫苗和待检疫苗以每孔100μl转移至包被和封闭好的酶联反应板。 1.2.3.4 在酶联反应板的B12~G12孔中加入稀释好的（1∶16）空白对照疫苗，每孔100μl。在酶联反应板A1～A12，B1～G1和H1～H12孔中加入稀释液，每孔100μl。 平板布局图 参考疫苗 阳性对照疫苗 待检疫苗1 待检疫苗2 待检疫苗3 参考疫苗 阳性对照疫苗 待检疫苗1 待检疫苗2 待检疫苗3 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A B 1:16 稀释1 稀释1 稀释1 稀释1 1:16 稀释1 稀释1 稀释1 稀释1 空白对照 C 1:32 稀释2 稀释2 稀释2 稀释2 1:32 稀释2 稀释2 稀释2 稀释2 空白对照 D 1:64 稀释3 稀释3 稀释3 稀释3 1:64 稀释3 稀释3 稀释3 稀释3 空白对照 E 1:128 稀释4 稀释4 稀释4 稀释4 1:128 稀释4 稀释4 稀释4 稀释4 空白对照 F 1:256 稀释5 稀释5 稀释5 稀释5 1:256 稀释5 稀释5 稀释5 稀释5 空白对照 G 1:512 稀释6 稀释6 稀释6 稀释6 1:512 稀释6 稀释6 稀释6 稀释6 空白对照 H 1.2.3.5 封板，21～25℃孵育60～75分钟。 1.2.3.6 弃去抗原稀释液在干毛巾上拍干，每孔加入300μl洗涤缓冲液冲洗3次，最好使用滴定板洗涤器。 1.2.3.7 用稀释液对辣根过氧化物酶标记的小鼠抗p46单克隆指示抗体按说明稀释至最适浓度。 1.2.3.8 向酶联反应板的所有反应孔（包括空白孔）加入的稀释好的指示抗体，每孔100μl。 1.2.3.9 封板，21～25℃孵育60～75分钟。 1.2.3.10 弃去指示抗体稀释液，在干毛巾上拍干，每孔加入300μl洗涤缓冲液冲洗3次，最好使用滴定板洗涤器。 1.2.3.11 加入底物 向酶联反应板的所有反应孔（包括空白孔）加入ABTS（使用前等体积混合试剂A和试剂B），每孔100μl。 1.2.3.12 封板，21～25℃下孵育，直至1∶16稀释的参考疫苗产生的非空白校正光密度值（OD）在1.750～1.950的范围内。 1.2.3.13 在检测前，使用轨道式震荡器以900rpm的速率震荡反应板20～40秒。 1.2.3.14 在酶标仪上震动最少5秒，然后在双波长模式下读取光密度值，检测波长为405 nm，参比波长为490nm或492nm。 1.2.4 相对效力值（RP）的测定 1.2.4.1将参考疫苗的5个稀释度（1∶16～1∶256）和待检疫苗的6个稀释度的校正光密度值输入到生物相对效价计算程序中，实际的稀释度用来计算相对效力。在RelPot中，设置最小OD参数为0.050，最小斜率为0.1。计算完成时取最高的RP。 1.2.4.2 生物相对效价计算程序是由美国兽药生物制品中心提供的用来检测疫苗样品相对效价值的软件。一个有效的RP值必须满足生物相对效价计算程序所规定的所有有效性标准。 1.2.4.3 一个有效试验的空白对照疫苗的平均光密度值不得高于0.150 。 1.2.4.4 阳性对照疫苗的RP值应在可接受的范围（硕腾公司提供特定批号的特定可接受范围）。 1.2.5 结果判定每批疫苗产品有效期内的RP值应≥1.0。按1.2.5.1～1.2.5.4的标准进行判定： 1.2.5.1检验中未得到有效曲线时，判为“无结果”，可用未稀释的疫苗进行重检。 1.2.5.2 如果首次检验（检验1）的RP值≥1.0（有效期内），可判该批产品合格。 1.2.5.3首次检验（检验1）中得到的有效曲线但不平行时，判为“结果可疑”。如果首次检验的结果为“结果可疑”，可按照1.2.5.3.1和1.2.5.3.2对该批产品重检最多3次（检验2，检验3，检验4）。如果不重检或不符合本节其他条款的规定，则该批产品判为不合格： 1.2.5.3.1 如果在首次检验可疑结果后进行的第1次重检（检验2）、连续2次检验可疑结果后进行的第2次重检（检验3）或连续3次检验可疑结果后进行的第3次重检（检验4）的RP值≥1.0（有效期内），判该批产品合格。 1.2.5.3.2如果在首次检验可疑结果后进行第1次重检（检验2）的RP值＜1.0（有效期内），则须根据第2次重检和第3次重检（检验3和检验4）的效力结果进行判定： 如果任何一次重检（检验3或检验4）的RP值＜1.0（有效期内），判定该批不合格。 如果任何一次重检（检验3或检验4）为结果可疑，或首次检验后的每次重检（检验2、检验3 和检验4）仍然为“结果可疑”，则判该批产品不合格。 1.2.5.4如果首次检验（检验1）RP值＜1.0（有效期内），按照1.2.5.4.1 和1.2.5.4.2 可对该批产品重检最少2次（检验2 和检验3），但最多重检3 次（检验2、检验3 和检验4），如果不进行重检或也不符合本节其他条款的规定，则视该批产品为不合格： 1.2.5.4.1如果连续2次重检（检验2和检验3）的RP值≥1.0（有效期内），判该批产品合格。如果2次重检中有一次重检（检验2或检验3）的RP值＜1.0（有效期内），判该批产品不合格。 1.2.5.4.2 如果一次重检（检验2 或检验3）的RP 值≥1.0（有效期内），另外一次重检（检验2 或检验3）为“结果可疑”，则可进行第3 次重检（检验4）。如果第3次重检（检验4）的RP 值≥1.0（有效期内），则该批产品视为合格。如果两次重检（检验2 和检验3）或第3 次重检（检验4）为“结果可疑”，则判该批产品不合格。 2 硫柳汞的检测 2.1 材料 2.1.1 LECO AMA254全自动汞含量分析仪 2.1.2 LECO液体助剂Com-Aid 2.1.3镍试样舟 2.1.4 移液器 2.1.5 容量瓶 2.1.6 分析天平 2.1.7 空白对照实验室纯化水，用于清洗分析仪 2.1.8 硫柳汞标准溶液（1%、0.01%、0.0001%、0.00015%、0.0002%、0.00025%和0.0003%），用于制作标准曲线。 2.1.8.1 1%硫柳汞储备液称取0.500g符合美国药典标准的硫柳汞参考标准品，加入50ml遮光容量瓶。勿用铝箔包住容量瓶，铝箔会与硫柳汞发生反应。将硫柳汞参考标准品溶解，用实验室纯化水定容至50ml，可保存6个月。 2.1.8.2 0.01%硫柳汞标准溶液取1ml 1%硫柳汞贮备液加入100ml容量瓶，用实验室纯化水定容。现用现配。 2.1.8.3 0.0001%硫柳汞标准溶液取1ml0.01%硫柳汞标准溶液加入100ml容量瓶，用实验室纯化水定容。现用现配。 2.1.8.4 0.00015%硫柳汞标准溶液 取3ml的0.01%硫柳汞标准溶液加入200ml容量瓶，用实验室纯化水定容。现用现配。 2.1.8.5 0.0002%硫柳汞标准溶液 取2ml的0.01%硫柳汞标准溶液加入100ml容量瓶，用实验室纯化水定容。现用现配。 2.1.8.6 0.00025%硫柳汞标准溶液 取5ml的0.01%硫柳汞标准溶液加入200ml容量瓶，用实验室纯化水定容。现用现配。 2.1.8.7 0.0003%硫柳汞标准溶液 取3ml的0.01%硫柳汞标准溶液加入100ml容量瓶，用实验室纯化水定容。现用现配。 2.1.9 用于漂移检测的0.0002%硫柳汞标准溶液 取1ml 1%硫柳汞储备液加入100ml容量瓶，用实验室纯化水定容，得到0.01%硫柳汞标准溶液；再将0.01%硫柳汞标准溶液取2ml加入100ml容量瓶，用实验室纯化水定容，得到0.0002%硫柳汞标准溶液。该溶液是为使标准曲线适应当前仪器响应。 2.1.10 用于准确性检测的0.0002%硫柳汞标准溶液 取1ml 1%硫柳汞储备液加入100ml容量瓶，用实验室纯化水定容，得到0.01%硫柳汞标准溶液；再将0.01%硫柳汞标准溶液取2ml加入100ml容量瓶，用实验室纯化水定容，得到0.0002%硫柳汞标准溶液。该溶液是为检测仪器准确性。 2.2 方法 2.2.1 标准曲线建立利用分析仪检测5个浓度的硫柳汞标准溶液（0.0001% ～ 0.0003%）的硫柳汞含量。检测不同浓度硫柳汞标准溶液时，需运行空白对照。自动生成标准曲线后，保存于分析仪中，供待检疫苗检测使用。在分析仪系统创建时建立标准曲线，在之后的使用过程中，也可对其更新和监控。 2.2.2待检疫苗检测。 2.2.2.1待检疫苗处理 量取两份2ml待检疫苗，置于100ml容量瓶中，用实验室纯化水定容。 2.2.2.2 开启分析仪。 2.2.2.3 在检测前，利用空白对照对分析仪进行清洗循环。 2.2.2.4 运行用于漂移检测的0.0002%硫柳汞标准溶液，操作分析仪系统使标准曲线微调校准，适应当前仪器响应。 2.2.2.5运行空白对照以清洗分析仪。 2.2.2.6运行用于准确性检测的0.0002%硫柳汞标准溶液。若标准溶液的结果在0.000196%～0.000204%之间，说明标准曲线有效，可以进行待检疫苗的检测。若硫柳汞标准溶液的检测结果不在0.000196%～0.000204%范围内，需额外进行两次检测，当两次检测的结果满足要求，说明标准曲线有效。若硫柳汞标准溶液的结果仍不满足要求，标准曲线不再有效或需对分析仪进行维护，重新配制硫柳汞标准溶液，建立新标准曲线。 2.2.2.7运行空白对照以清洗分析仪。 2.2.2.8分别检测两份待检疫苗的制备品。在对任何液体样品进行分析前，先将一勺LECO液体助剂Com-Aid加入到镍试样舟中。硫柳汞检测结果会以ppm单位形式显示在系统界面ppm Hg列，1ppm=0.0001%。 2.2.2.9运行空白对照以清洗分析仪。 2.3检验结果合格标准 2.3.1检验结果需符合产品质量标准。分析仪报告的结果为检测浓度，单份待检疫苗硫柳汞浓度=检测浓度×稀释倍数，一次检验的最终结果为两份待检疫苗硫柳汞浓度的平均值。 2.3.2如果首次检验结果不合格，可将首次检验的待检疫苗重复检验两次，取首次检验结果和两次重复检验结果的平均值作为最终检验结果。 2.3.3如果由试验操作失误造成首次检验不合格，可将首次检验的待检疫苗重复检测两次，取两次重复检验结果的平均值作为最终检验结果。 八、犬细小病毒病活疫苗（NL-35-D株）质量标准 犬细小病毒病活疫苗（NL-35-D株） Quan Xixiaobingdubing Huoyimiao（NL-35-D Zhu） Parvovirus Vaccine，Live（Strain NL-35-D） 本品系用犬细小病毒NL-35-D株接种犬肾（NL-DK-1）细胞培养，收获细胞培养物制成。用于预防犬细小病毒引起的肠炎。 【性状】 微黄色至粉色澄明液体。 【无菌检验】 按现行《中国兽药典》三部附录进行检验，应无菌生长。 【支原体检验】 按现行《中国兽药典》附录进行检验，应无支原体生长。 【外源病毒检验】 按现行《中国兽药典》附录进行检验，应无外源病毒污染。 【安全检验】 用体重14～26g小鼠16只，8只脑内注射疫苗，每只0.03ml；另8只腹腔内注射疫苗，每只0.5ml。观察7日，应不出现疫苗引起的不良反应。 用成年健康犬2只，各皮下注射疫苗2.0ml（含2头份），观察14日，应不出现疫苗引起的不良反应。 【效力检验】 按附注进行，阴性对照（稀释液）孔应为阴性，按Spearman-Karber法计算TCID50。每头份疫苗中犬细小病毒含量应不低于107.0TCID50。 【汞类防腐剂残留量测定】 按现行《中国兽药典》附录进行测定，应不超过0.010%。 【作用与用途】 用于预防犬细小病毒引起的肠炎。 【用法与用量】 皮下或肌肉注射，每次1头份（1ml）。推荐首次对6周龄或6周龄以上犬接种3次，每次间隔3周，以后每年接种1次。 【注意事项】 （1）仅用于接种健康犬，禁止接种怀孕母犬。 （2）疫苗不得冻结或长时间暴露在高温下或阳光直射。 （3）使用前应充分摇匀。 （4）疫苗瓶启封后，应一次用完。 （5）接种时，应按常规无菌操作；注射器和针头不能使用化学方法消毒。 （6）疫苗内含有庆大霉素。 （7）用过的疫苗瓶和未用完的疫苗应焚毁。 （8）如果动物处于某些传染性疾病的潜伏期、营养不良、有寄生虫感染、处于运输或环境应激状态下或存在免疫抑制，或者未按说明书进行接种，均可能引起免疫失败。 （9）接种疫苗后，个别犬可能出现过敏反应，此时，可用肾上腺素进行抢救，并采取适当的辅助治疗措施。 【规格】 （1）1头份/瓶 （2）10头份/瓶 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为18个月。 【生产企业】 硕腾公司美国林肯厂（Zoetis Inc., Lincoln, USA） 地址：601 West Cornhusker Highway, Lincoln, Nebraska, 68521, USA 附注： 犬细小病毒（CPV）病毒含量测定 1 材料 1.1 细胞培养板 96孔微量细胞培养板。 1.2 细胞 培养1～7小时、覆盖率达40%～70%融合的犬肾（NL-DK-1）细胞。 1.3 细胞生长液 含有犊牛血清（5.0%）、庆大霉素（0.1%）和L-谷氨酰胺或Glutamax-1（L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）（1.0%）的DMEM。 1.4 稀释液 含有庆大霉素（0.1%）和L-谷氨酰胺或Glutamax-1（L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）（1.0%）的DMEM。 1.5 培养箱 34～38℃、3～5%CO2培养箱。 1.6 CPV阳性效力检测对照 1.7 CPV特异性单克隆抗体（使用时需稀释） 1.8 FITC标记的羊抗鼠IgG结合物（使用时需稀释） 1.9 80%丙酮溶液（80ml丙酮+20ml高压灭菌水） 1.10 PBS缓冲液 0.01mol/L，pH值7.2～7.6。 1.11 荧光显微镜 2 方法 2.1 将疫苗用稀释液做10倍系列稀释，取适当稀释度分别接种NL-DK-1细胞板。同时，融化阳效力检测对照，用稀释液做10倍系列稀释，保证稀释到检测终点（依据阳性对照检验报告的效价结果进行稀释）。 2.2 弃掉培养板各孔中的细胞生长液，向孔中加入稀释后的样品和效力对照品，每一稀释度接种6孔，每孔0.2ml。设阴性对照孔（稀释液）。置34～38℃、3～5%CO2湿度培养箱培养。 2.3 培养4日后，弃去培养板各孔中的液体，用PBS冲洗和吸干。 2.4 用80%丙酮溶液在15～30℃固定至少10分钟后，弃去丙酮溶液，风干（固定后的细胞可在冰箱内保存1周）。 2.5 加入CPV特异性单克隆抗体（≥60μl/孔，使足以覆盖单层细胞），34～38℃湿润条件下孵育20～120分钟。 2.6 弃去液体，用PBS冲洗2次。 2.7 加入FITC标记的羊抗鼠IgG结合物，34～38℃湿润条件下孵育20～120分钟。 2.8 弃去液体，用PBS冲洗，至少2次（最后一次冲洗应在室温下放置≥10分钟），倒净后，马上用自来水清洗细胞，以去除剩余的盐分。 3 结果判定 3.1 用荧光显微镜（80～400倍）观察，出现特异性荧光的孔判为阳性，否则判为阴性。 3.2 当阳性对照病毒含量结果在可接受范围内，而阴性对照孔无特异性荧光时，试验成立。 3.3 根据出现荧光阳性的孔数，按Spearman-Karber法计算病毒含量（TCID50）。 附件3 莫奈太尔内服溶液等8种兽药产品说明书和标签 一、 莫奈太尔内服溶液说明书和标签 （一）莫奈太尔内服溶液说明书 兽用 【兽药名称】 通用名称：莫奈太尔内服溶液 商品名称：佐唯斯（Zolvix） 英文名称：Monepantel Oral Solution 汉语拼音：Monaitaier Neifurongye 【主要成分】 莫奈太尔 【性状】 本品为黄色至橙色澄清液体。 【药理作用】 抗蠕虫药。莫奈太尔属于氨基乙腈衍生物（AAD）类抗蠕虫药。本品作用于线虫特异性烟碱乙酰胆碱受体亚基Hco-MPTL-1，具有快速、高效和渗透性的神经肌肉效应，通过引起体壁肌肉过度收缩导致咽前部麻痹、痉挛性收缩并最终死亡。本品对耐受其他类别药物的线虫有效。 本品经口给药后，易于吸收，并氧化成砜代谢产物。在1天内达到血药峰浓度。之后血药浓度降低，半衰期约为5天。主要通过粪便排泄，少量通过尿液排泄。给药前或给药后不久进食或禁食均不影响疗效。 【适应证】 用于治疗和控制绵羊胃肠线虫感染。 【用法与用量】 以莫奈太尔计。内服：一次量，每1kg体重，绵羊2.5mg（相当于本品每10kg体重1ml）。本品为单次给药。根据不同地区疫情流行情况，可以重复给药。具体给药剂量见下表： 体重（kg） 剂量（ml） 10～15 1.5 16～20 2 21～25 2.5 26～30 3 31～35 3.5 36～40 4 41～50 5 51～60 6 61～70 7 >70kg 每增加10kg增加给药1ml 【不良反应】 按推荐的用法用量使用，暂未见不良反应。 【注意事项】 1. 本品可用于繁殖绵羊，包括怀孕和哺乳母羊。 2. 可能生产供人类食用乳品的母羊禁用。 3. 本品对体重不足10kg绵羊的疗效尚不明确，对体重不足10kg或不足2周龄绵羊的安全性尚不明确。 4. 为确保精确给药，应尽可能准确称量动物体重。给药前，检查给药器具的准确度和正常运行情况。 5. 如群体给药，应根据动物体重分组，并按组内动物最大体重确定给药量，以避免药量不足。使用后清洗给药设备。 6. 为避免因产生耐药性影响疗效，应避免以下操作：在持续一段时间内，过度频繁和重复使用同类抗蠕虫药；因体重估计不准确或未校准剂量给药器具导致给药不足。建议一年内使用本品不超过两次。 7. 切勿在标签标注的有效期后使用。一旦开封，请在1年内使用。 8. 由于缺乏相容性研究，本品不得与其他兽药混合使用。 9. 处理本品时请勿进食、饮水或吸烟；应佩戴个人防护装备，包括手套。处理后，应洗手和接触过本品的皮肤。 10. 当皮肤或眼睛意外接触本品时，应立即用水清洗。脱去所有污染衣物。如果误食，应立即就医，并向医生出示包装说明书或标签。 11. 按照当地有关规定处理未使用的兽药或兽药使用过程中产生的废弃物。 12. 置于儿童视线和接触范围之外。 【休药期】 绵羊9日。 【规格】 2.5% 【包装】 【贮藏】 密闭保存。 【有效期】 24个月。 【进口兽药注册证号】 【生产企业】 阿金塔-邓地有限公司（Argenta Dundee Limited） 地址：Kinnoull Road, Dunsinane Industrial Estate, Dundee, DD2 3XR, United Kingdom （二）莫奈太尔内服溶液标签 兽用 【兽药名称】 通用名称：莫奈太尔内服溶液 商品名称：佐唯斯（Zolvix） 英文名称：Monepantel Oral Solution 汉语拼音：Monaitaier Neifurongye 【主要成分】 莫奈太尔 【性状】 本品为黄色至橙色澄清液体。 【适应证】 用于治疗和控制绵羊胃肠线虫感染。 【用法与用量】 以莫奈太尔计。内服：一次量，每1kg体重，绵羊2.5mg（相当于本品每10kg体重1ml）。本品为单次给药。根据不同地区疫情流行情况，可以重复给药。具体给药剂量见下表： 体重（kg） 剂量（ml） 10～15 1.5 16～20 2 21～25 2.5 26～30 3 31～35 3.5 36～40 4 41～50 5 51～60 6 61～70 7 >70kg 每增加10kg增加给药1ml 【规格】 2.5% 【进口兽药注册证号】 【生产日期】 【生产批号】 【有效期】至 【休药期】 绵羊9日。 【贮藏】 密闭保存。 【包装】 【生产企业】 阿金塔-邓地有限公司（Argenta Dundee Limited） 地址：Kinnoull Road, Dunsinane Industrial Estate, Dundee, DD2 3XR, United Kingdom 二、葡萄糖酸氯己定溶液（泌乳期）说明书和标签 （一）葡萄糖酸氯己定溶液（泌乳期）说明书 兽用 外用药 【兽药名称】 通用名称：葡萄糖酸氯己定溶液（泌乳期） 商品名称：世德来 乳健(KENOCIDIN) 英文名称：Chlorhexidine Gluconate solution （Lactating Cow) 汉语拼音：Putaotangsuan Lüjiding Rongye(miruqi) 【主要成分】 葡萄糖酸氯己定 【性状】 本品为深蓝色粘稠溶液，有薄荷味。 【药理作用】 消毒防腐药。氯己定为阳离子表面活性剂。对革兰氏阳性菌、阴性菌和真菌均有杀灭作用。氯己定主要通过与细胞膜内的酸性磷脂酸发生静电作用而改变膜通透性，从而导致细菌细胞壁的通透性改变、缺失。低浓度的氯己定可导致细胞内容的渗漏引起细胞死亡；高浓度的氯己定可导致细胞内容物的凝结、沉淀。 【适应证】 用于奶牛乳头消毒，预防泌乳期奶牛乳房炎。维护奶牛乳头皮肤和乳头末端健康。 【用法与用量】 乳头消毒：取本品至少5ml置乳头浸润杯内，挤奶后立即将奶牛乳头浸入溶液中，确保乳头至少浸入3/4长度，使用过程中按需要适量添加。同一浸润杯如在不同奶牛间使用，应更换杯内产品。如果浸润杯被污染，应清洗后再用。1日2次。 【不良反应】 按推荐剂量使用，未见不良反应。 【注意事项】 1.本品仅供外用。 2.奶牛乳头皮肤完好时才可使用本品，奶牛乳头皮肤出现损伤时暂停使用。 3.挤奶前，应清洗奶牛乳房和乳头并擦干。有机物（脓汁、血液等）存在会降低本品功效。 4.如果户外温度低于冰点，使用本品后，在奶牛乳头干燥前勿将奶牛驱至室外。 5.使用本品后，应在乳头干燥后方可将奶牛置于湿（下雨）、冷和有风的环境中。 6.瓶子开启后6个月内有效，未用完部分应废弃。 7.避免霜冻，若发生结冰，应将产品至温暖地方解冻，并用前摇匀。倒入浸润杯里的溶液，请勿倒回原包装瓶内。 8.阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂或无机阴离子可使本品失去活性，勿将本品与自来水、其它化学品、消毒剂或其它用于乳头、乳房护理的产品混用，勿使用本品清洗或消毒挤奶设备。 9.使用本品过程中，避免接触眼睛。若溅入眼睛，请用大量水先冲洗并就医，若误食本品，需大量饮水并就医，使用本品后，请洗手。 10.对氯己定过敏者及儿童勿接触本品。 11.本品对鱼和其它水生生物有害，勿直接排入环境水系中。 【休药期】 牛0日；弃奶期0小时。 【规格】 0.5%。 【包装】 1L 5L 10L 20L 25L 60L 200L 【贮藏】 遮光，密封，在干燥处保存。 【有效期】 18个月。 【进口兽药注册证号】 【生产企业】 世德来有限公司（CID LINES NV） 地址：Waterpoorstraat2,Ieper,West-Vlaanderen,B-8900,Beigium （二）葡萄糖酸氯己定溶液（泌乳期）标签 兽用 外用药 【兽药名称】 通用名称：葡萄糖酸氯己定溶液（泌乳期） 商品名称：世德来 乳健(KENOCIDIN) 英文名称：Chlorhexidine Gluconate solution （Lactating Cow) 汉语拼音：Putaotangsuan Lüjiding Rongye(miruqi) 【主要成分】 葡萄糖酸氯己定 【性状】 本品为深蓝色粘稠液体，有薄荷香味。 【适应证】 用于奶牛乳头消毒，预防泌乳期奶牛乳房炎。维护奶牛乳头皮肤和乳头末端健康。 【用法与用量】 取本品至少5ml置乳头浸润杯内，挤奶后立即将奶牛乳头浸入溶液中，确保乳头至少浸入3/4长度，使用过程中按需要适量添加。同一浸润杯如在不同奶牛间使用，应更换杯内产品。如果浸润杯被污染，应清洗后再用。1日2次。 【休药期】 牛0日；牛奶0小时。 【规格】 0.5% 【包装】 1L 5L 10L 20L 25L 60L 200L 【生产日期】 【生产批号】 【有效期】至 【贮藏】 遮光，密封，在干燥处保存。 【进口兽药注册证号】 【生产企业】 世德来有限公司（CID LINES NV） 地址：Waterpoorstraat2,Ieper,West-Vlaanderen,B-8900,Beigium 三、双甲脒溶液说明书和标签 （一）双甲脒溶液说明书 兽用 外用 【兽药名称】 通用名称：双甲脒溶液 商品名称：特敌克（Taktic 12.5%） 英文名称：Amitraz Solution 汉语拼音：Shuangjiami Rongye 【主要成分】 双甲脒 【性状】 本品为微黄色澄清液体。 【药理作用】 广谱杀寄生虫药，主要作用于蜱、螨和虱等神经系统，提高神经系统的兴奋性，导致其运动增加，将口器从寄生部位移开，最后从动物身上掉落。双甲脒具有触杀、拒食和驱避作用，也有一定的胃毒和内吸作用。双甲脒药效残存时间长，能够有效防治体外寄生虫。对不同发育阶段的蜱和螨有效。 双甲脒在土壤中的半衰期约为24小时，在土壤中很快降解。在酸性土壤中降解速度快于中性和碱性土壤。 【适应证】 用于治疗和控制牛、羊、猪体外寄生虫。主用于杀螨；也可用于杀蜱、虱等外寄生虫。 【用法与用量】 牛、羊：喷洒或药浴；猪，喷洒。加清水配至所需浓度，现用现配。 喷洒给药 以双甲脒计：牛，0.025%，喷洒至动物全身皮肤完全浸透；整群治疗，虱、螨严重感染病例，应在7～10天后进行二次喷洒。羊，0.05%，喷洒至动物全身皮肤完全浸透。猪，0.05%，喷洒至动物全身皮肤完全浸透，特别是耳廓、四肢内侧；建议全群喷洒，7～10天后可进行二次喷洒；常规性治疗方案为：应每2～3个月定期喷洒公猪给药；在母猪转移至产仔舍时、小猪断奶后或转入育肥舍前、新增入群猪只在混群前进行喷洒给药。 药浴给药 以双甲脒计：羊，0.05%，使羊在药液中浸泡约30秒，头部至少浸没一次。 【不良反应】 按推荐的用法用量使用，暂未发现不良反应。如意外发生给药过量事件，有可能会出现中枢神经系统抑郁，如嗜睡、镇静、共济失调、消化紊乱伴随厌食。通常可自然恢复，无需临床治疗。如有必要，可进行辅助治疗直到症状消失。 【注意事项】 1. 马属动物对双甲脒敏感，慎用。 2. 对鱼类有剧毒，不能将药物或容器弃于池塘或河流。 3. 禁用于产奶羊和水生食品动物。 4. 本品对皮肤和眼睛有刺激作用，使用时防止药液沾污皮肤和眼睛。 5. 本品仅供外用。 6. 避免儿童接触本品。 【休药期】 牛、羊21日；猪8日；弃奶期48小时。 【规格】 12.5% 【包装】 【贮藏】 避光、密封保存。 【有效期】 48个月。 【进口兽药注册证号】 【生产企业】 英特威国际有限公司法国生产厂（Intervet Productions） 地址：Rue De Lyons，27460 Igoville，France （二）双甲脒溶液标签 兽用 外用 【兽药名称】 通用名称：双甲脒溶液 商品名称：特敌克（Taktic 12.5%） 英文名称：Amitraz Solution 汉语拼音：Shuangjiami Rongye 【主要成分】 双甲脒 【性状】 本品为微黄色澄清液体。 【适应证】 用于治疗和控制牛、羊、猪体外寄生虫。主用于杀螨；也可用于杀蜱、虱等外寄生虫。 【用法与用量】 牛、羊：喷洒或药浴；猪，喷洒。加清水配至所需浓度，现用现配。 喷洒给药 以双甲脒计：牛，0.025%，喷洒至动物全身皮肤完全浸透；整群治疗，虱、螨严重感染病例，应在7～10天后进行二次喷洒。羊，0.05%，喷洒至动物全身皮肤完全浸透。猪，0.05%，喷洒至动物全身皮肤完全浸透，特别是耳廓、四肢内侧；建议全群喷洒，7～10天后可进行二次喷洒；常规性治疗方案为：应每2～3个月定期喷洒公猪给药；在母猪转移至产仔舍时、小猪断奶后或转入育肥舍前、新增入群猪只在混群前进行喷洒给药。 药浴给药 以双甲脒计：羊，0.05%，使羊在药液中浸泡约30秒，头部至少浸没一次。 【休药期】 牛、羊21日；猪8日；弃奶期48小时。 【规格】 12.5% 【包装】（1）1升/瓶 （2）5升/瓶 （3）20升/瓶 【贮藏】避光、密封保存。 【有效期】至 【进口兽药注册证号】 【生产企业】英特威国际有限公司法国生产厂（Intervet Productions） 地址：Rue De Lyons，27460 Igoville，France 四、种鸡球虫活疫苗说明书和内包装标签 （一）种鸡球虫活疫苗说明书 兽用 【兽药名称】 通用名 种鸡球虫活疫苗 商品名 球可净 英文名 Coccidiosis Vaccine , Live Oocysts 汉语拼音 Zhongji Qiuchong Huoyimiao 【主要成分与含量】 含有巨型、堆型、柔嫩、变位、毒害、布氏、早熟和哈氏艾美尔球虫孢子化卵囊，每个虫种的卵囊至少为200个/羽份。 【性状】 黄色至棕色悬液。 【作用与用途】 用于预防种鸡球虫病。 【用法与用量】 用于4日龄种鸡喷料接种。按瓶签注明羽份稀释，每只1羽份。喷料方法：每1000羽份兑蒸馏水400ml，均匀喷于饲料表面，供自由采食。 【不良反应】 无 【注意事项】 （1） 仅用于接种平养的健康后备种鸡。 （2） 接种前、后24小时内，不得使用抗球虫药和消毒剂。 （3） 接种后，应保持鸡舍垫料具有一定湿度。 （4） 疫苗一旦开启，应一次用完。 （5） 用过的疫苗瓶和稀释后剩余的疫苗应焚毁。 （6） 屠宰前21日内禁用。 【规格】 （1）4ml（1000羽份）/瓶 （2）10ml（5000羽份）/瓶 【包装】 10瓶/盒 【贮藏与有效期】 2～8℃避光保存，有效期为12个月。 【《进口兽药注册证书》证号】 【生产企业】 英特威美国分公司（Intervet Inc.） 地址 ROUTE 411 West Delaware Avenue, Millsboro, Delaware 19966 电话 1- 800- 211-3573 仅在兽医指导下使用 （二）种鸡球虫活疫苗内包装标签 球可净 种鸡球虫活疫苗 兽用 1000（5000）羽份/瓶 《进口兽药注册证书》证号： 生产日期： 有效期至： 生产批号： 详见说明书。 【作用与用途】 用于预防种鸡球虫病。 【贮藏与有效期】 2～8℃避光保存，有效期为12个月。 【生产企业】 英特威美国分公司 仅在兽医指导下使用 五、种鸡新城疫灭活疫苗（La Sota株）说明书和内包装标签 （一）种鸡新城疫灭活疫苗（La Sota株）说明书 兽用 【兽药名称】 通用名 种鸡新城疫灭活疫苗（La Sota株） 商品名 新油佳 英文名 Newcastle Disease Vaccine，Inactivated（Strain La Sota） 汉语拼音 Zhongji Xinchengyi Miehuoyimiao（La Sota Zhu） 【主要成分与含量】 疫苗中含灭活的鸡新城疫病毒（La Sota株），灭活前的病毒含量至少为109.0EID50/ml。 【性状】 乳白色均匀乳剂。 【作用与用途】 用于预防种鸡新城疫。 【用法与用量】 皮下或肌肉注射，每只0.5ml。在后备蛋鸡或种鸡开产前3～4周即16～20周龄时接种。 【不良反应】 注射部位可能会出现轻度肿胀，一般在2～3周内自行消失。 【注意事项】 （1）仅用于接种健康鸡。 （2）使用前应将疫苗在室温（15～25℃）下放置3～4小时。 （3）使用前和使用过程中应充分振摇疫苗瓶。 （4）疫苗一旦开启，应在24小时内用完。 （5）接种时应采用常规无菌操作。 （6）不要与其他疫苗或药物混合使用。 （7）用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应进行无害化处理。 【规格】 （1）250ml（500羽份）/瓶 （2）500ml（1000羽份）/瓶 【包装】 5瓶/箱 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为24个月。 【《进口兽药注册证书》证号】 【生产企业】 匈牙利诗华-费拉西亚兽医生物制品有限公司（CEVA-PHYLAXIA Veterinary Biologicals Co. Ltd.） 地址：1107 Budapest，Szallas u.5. - Hungary 电话：（361）2629505 仅在兽医指导下使用 （二）种鸡新城疫灭活疫苗（La Sota株）内包装标签 兽用 新油佳 种鸡新城疫灭活疫苗（La Sota株） 250（500）ml/瓶 《进口兽药注册证书》证号： 批 号： 有效期至： 【作用与用途】 用于预防种鸡新城疫。 【用法与用量】 皮下或肌肉注射，每只0.5 ml。在后备蛋鸡或种鸡开产前3～4周 即16～20周龄时接种。 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为24个月。 【生产企业】 匈牙利诗华-费拉西亚兽医生物制品有限公司（CEVA-PHYLAXIA Veterinary Biologicals Co. Ltd.） 仅在兽医指导下使用 六、复方阿莫西林乳房注入剂（泌乳期）说明书和标签 （一）复方阿莫西林乳房注入剂（泌乳期）说明书 兽用处方药 【兽药名称】 通用名称：复方阿莫西林乳房注入剂（泌乳期） 商品名称：速诺®（Synulox® LC） 英文名称：Compound Amoxicillin Intramammary Infusion (Lactating Cow) 汉语拼音：Fufang Amoxilin Rufangzhuruji（Miruqi） 【主要成分】 阿莫西林、克拉维酸、泼尼松龙 【性状】 本品为白色至类白色油状混悬液。 【药理作用】 抗生素类药。阿莫西林是一种广谱抗生素，通过抑制细菌细胞壁合成而发挥杀菌作用，对引起乳房炎的多种革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌有杀菌活性，如葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌。克拉维酸是一种b-内酰胺酶抑制剂，与阿莫西林合用，可明显地降低阿莫西林对产b-内酰胺酶的耐青霉素金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的体外最小抑菌浓度，提高对青霉素耐药菌的治愈率。泼尼松龙具有抗炎作用，有助于减轻炎症和组织肿胀，促进乳房炎的恢复。 【适应证】 主要用于治疗革兰氏阳性菌和阴性菌引起的奶牛泌乳期乳房炎。 【用法与用量】 乳管注入：泌乳期奶牛，挤奶后每乳室1支，每日2次，连用3次。清洗和消毒乳头。将注射器头部插入乳管，轻轻的注入药液，每个乳区各注入1支，直到都挤进乳管内。 如何选择和使用短头：用拇指和食指拿住白色盖的顶部，弯曲顶部，使顶盖分离并取下顶盖（如图），不要用手指接触注射器头部；只将注射器头部小头插入乳头管 （如图），轻轻的持续挤压注射器活塞，直到悬液都挤进乳管内。 如何选择和使用长头：用拇指和食指拿住白色盖的底部，弯曲，使白盖分离并取下白盖（如图），不要用手指接触注射器头部；将注射器头部插入乳头管（如图），轻轻的持续挤压注射器活塞，直到悬液都挤进乳管内。 【不良反应】 按推荐剂量使用，暂未见不良反应。 【注意事项】1. 仅供泌乳期奶牛乳房炎使用。 2. 对青霉素过敏者不要接触本品。使用人员应避免直接接触产品中的药物，用后洗手。如出现皮肤起红疹，应马上请医生诊治；脸、唇和眼肿胀或呼吸困难为严重过敏表现，急需医疗救护。 3. 置于儿童无法触及处。 【休药期】牛7日；弃奶期60小时。 【规格】 3g:阿莫西林0.2g（以C16H19N3O5S 计）+克拉维酸钾50mg（以C8H9NO5计）+泼尼松龙10mg 【包装】 【贮藏】 25℃以下，密闭保存。 【有效期】 18个月。 【进口兽药注册证号】 【生产企业】 意大利豪普特制药厂（HauptPharma Latina s.r.l.） 地址：SS 156 Km 47,600-04100 Borgo San Michele, Latina, Italy （二）复方阿莫西林乳房注入剂（泌乳期）标签 复方阿莫西林乳房注入剂（泌乳期）内包装标签 兽用处方药 【兽药名称】 通用名称：复方阿莫西林乳房注入剂（泌乳期） 商品名称：速诺®（Synulox® LC） 英文名称：Compound Amoxicillin Intramammary Infusion (Lactating Cow) 汉语拼音：FufangAmoxilinRufangzhuruji（Miruqi） 【适应证】主要用于治疗革兰氏阳性菌和阴性菌引起的奶牛泌乳期乳房炎。 【规格】3g:阿莫西林0.2g（以 C16H19N3O5S计）+克拉维酸钾50mg（以 C8H9NO5计）+泼尼松龙10mg 【包装】 【进口兽药注册证号】 【生产日期】 【生产批号】 【有效期】至 【生产企业】意大利豪普特制药厂（HauptPharma Latina s.r.l.） 地址：SS 156 Km 47,600-04100 Borgo San Michele, Latina, Italy 复方阿莫西林乳房注入剂（泌乳期）外包装标签 兽用处方药 【兽药名称】 通用名称：复方阿莫西林乳房注入剂（泌乳期） 商品名称：速诺®（Synulox® LC） 英文名称：Compound Amoxicillin Intramammary Infusion (Lactating Cow) 汉语拼音：FufangAmoxilinRufangzhuruji（Miruqi） 【主要成分】阿莫西林、克拉维酸、泼尼松龙 【性状】本品为白色至类白色油状混悬液。 【适应证】主要用于治疗革兰氏阳性菌和阴性菌引起的奶牛泌乳期乳房炎。 【用法与用量】乳管注入：泌乳期奶牛，挤奶后每乳室1支，每日2次，连用3次。 【规格】3g:阿莫西林0.2g（以C16H19N3O5S计）+克拉维酸钾50mg（以C8H9NO5计）+泼尼松龙10mg 【进口兽药注册证号】 【生产日期】 【生产批号】 【有效期】至 【休药期】牛7日；弃奶期60小时。 【贮藏】25℃以下，密闭保存。 【包装】 【生产企业】意大利豪普特制药厂（HauptPharma Latina s.r.l.） 地址：SS 156 Km 47,600-04100 Borgo San Michele, Latina, Italy 七、猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株,Ⅰ）说明书和内包装标签 （一）猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株,Ⅰ）说明书 兽用 【兽药名称】 通用名 猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株,Ⅰ） 商品名 瑞富特-旺® 英文名Mycoplasma HyopneumoniaeBacterin 汉语拼音 Zhu ZhiyuantifeiyanMiehuoyimiao（P-5722-3 Zhu,Ⅰ） 【主要成分与含量】 含灭活的猪肺炎支原体P-5722-3株，每头份相对效力RP≥1.0。 【性状】 灰白色至浅褐色乳剂。 【作用与用途】 用于预防猪支原体肺炎。 【用法与用量】 肌肉注射。3周龄以上的健康猪，每头2 ml。种猪：易感猪或免疫状况不明的猪在引入畜舍前应接种一次。以后每半年加强接种一次。 【不良反应】 一般无肉眼可见不良反应。极少数情况下会发生过敏反应，如发生，解毒剂为肾上腺素。 【注意事项】 （1）仅用于接种健康猪。 （2）开封后一次用完。 （3）避免冻结。 （4）用前摇匀。 （5）疫苗中含有青霉素和硫柳汞作为防腐剂。 （6）用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应进行无害化处理。 （7）屠宰前21日内禁止使用。 【规格】 （1）10头份/瓶（2）50头份/瓶（3）125头份/瓶（4）250头份/瓶（5）500头份/瓶 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为24个月。 【《进口兽药注册证书》证号】 【生产企业】 硕腾公司美国查理斯堡生产厂（Zoetis Inc.） 地址 2000 Rockford Road，Charles City，50616-9989，Iowa，USA 仅在兽医指导下使用 （二）猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株,Ⅰ）内包装标签 兽用 瑞富特-旺® 猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株,Ⅰ） 10（50、125、250、500）头份/瓶 《进口兽药注册证书》证号： 批号： 有效期至： 详见说明书。 【作用与用途】 用于预防猪支原体肺炎。 【用法与用量】 肌肉注射。3周龄以上的健康猪，每头2 ml。以后每半年加强接种一次。 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为24个月。 【生产企业】 硕腾公司美国查理斯堡生产厂 仅在兽医指导下使用 八、犬细小病毒病活疫苗（NL-35-D株）说明书和内包装标签 （一）犬细小病毒病活疫苗（NL-35-D株）说明书 兽用 【兽药名称】 通用名 犬细小病毒病活疫苗（NL-35-D株） 商品名 卫佳®细 英文名 Parvovirus Vaccine，Live（Strain NL-35-D） 汉语拼音 Quan Xixiaobingdubing Huoyimiao（NL-35-D Zhu） 【主要成分与含量】 含犬细小病毒NL-35-D株至少107.0TCID50/头份。 【性状】 微黄色至粉色澄明液体。 【作用与用途】 用于预防犬细小病毒引起的肠炎。 【用法与用量】 皮下或肌肉注射，每次1头份（1ml）。推荐首次对6周龄或6周龄以上犬连续接种3次，每次间隔3周，以后每年接种1次。 【不良反应】 接种疫苗后，个别犬可能出现过敏反应，此时，可用肾上腺素进行抢救，并采取适当的辅助治疗措施。 【注意事项】 （1）仅用于接种健康犬，禁止接种怀孕母犬。 （2）疫苗不得冻结或长时间暴露在高温下或阳光直射。 （3）使用前应充分摇匀。 （4）疫苗瓶启封后，应一次用完。 （5）接种时，应按常规无菌操作；注射器和针头不能使用化学方法消毒。 （6）疫苗内含有庆大霉素。 （7）用过的疫苗瓶和未用完的疫苗应焚毁。 （8）如果动物处于某些传染性疾病的潜伏期、营养不良、有寄生虫感染、处于运输或环境应激状态下或存在免疫抑制，或者未按说明书进行接种，均可能引起免疫失败。 【规格】 （1）1头份（1ml）/瓶 （2）10头份（10ml）/瓶 【包装】 （1）50×1头份（1ml）瓶/盒 （2）5×10头份（10ml）瓶/盒 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为18个月。 【《进口兽药注册证书》证号】 【生产企业】 硕腾公司美国林肯厂（Zoetis Inc., Lincoln, USA） 地址：601 West Cornhusker Highway, Lincoln, Nebraska, 68521, USA 仅在兽医指导下使用 （二）犬细小病毒病活疫苗（NL-35-D株）内包装标签 兽用 卫佳®细 犬细小病毒病活疫苗（NL-35-D株） 1（10）头份/瓶 《进口兽药注册证书》证号： 批 号： 生产日期： 【用法与用量】 皮下或肌肉注射，每次1头份（1ml）。首次接种对6周龄或6周龄以上犬连续接种3次，每次间隔3周，以后每年接种1次。 【贮藏与有效期】 2～8℃保存，有效期为18个月。 【生产企业】 硕腾公司美国林肯厂（Zoetis Inc., Lincoln, USA） 仅在兽医指导下使用 附件4 莫奈太尔每日允许摄入量（ADI）、最高残留限量标准（MRLs）（试行）和残留检测方法标准（试行） 申报单位参照国际食品法典委员会（CAC）的标准制定了莫奈太尔的每日允许摄入量（ADI）和莫奈太尔在绵羊组织中的最高残留限量（MRLs），如下表： 活性成分 残留 标示物 动物 品种 靶组织 MRLs 其他规定 莫奈太尔 ADI： 0～20 μg/kg b.w./d 莫奈太尔砜 绵羊 肌肉 500μg·kg-1 禁用于供人类食用乳品的动物 肝脏 7000μg·kg-1 肾脏 1700μg·kg-1 脂肪 13000μg·kg-1 绵羊可食性组织中莫奈太尔砜残留量的测定 液相色谱-串联质谱法（试行） 1 范围 本标准规定了绵羊可食性组织中莫奈太尔砜残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。 本标准适用于绵羊肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中莫奈太尔砜残留量的检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 1.1-2000 标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试料中莫奈太尔的残留标示物莫奈太尔砜，用乙腈提取，稀释后用液相色谱-串联质谱法测定，外标法定量。 4 试剂和材料 以下所用的试剂，除特别注明外均为分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。 4.1 莫奈太尔砜对照品：纯度≥98.8%。 4.2 超纯水：由Milli-Q超纯水仪制取。 4.3 乙腈：色谱纯。 4.4 甲醇：色谱纯。 4.5 微孔滤膜：0.2μm。 4.6 莫奈太尔砜标准贮备液（1mg/mL）：精密称取莫奈太尔砜对照品10mg，于10mL量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，配制成浓度为1mg/mL的标准贮备液。-20℃保存，有效期6个月。 4.7 莫奈太尔砜标准工作液（100μg/mL）：精密量取莫奈太尔砜标准贮备液5mL，于50mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度。-20℃保存，有效期6个月。 4.8 莫奈太尔砜标准工作液（10μg/mL）：精密量取莫奈太尔砜标准工作液（100μg/mL）5mL，于50mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度。-20℃保存，有效期6个月。 4.9 莫奈太尔砜标准工作液（1μg/mL）：精密量取莫奈太尔砜标准工作液（10μg/mL）5mL，于50mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度。-20℃保存，有效期6个月。 4.10 稀释液：准确量取乙腈500mL、甲醇100mL、水400mL，混匀，即得。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。 5.2 分析天平：感量0.00001g。 5.3 天平：感量0.01g。 5.4 组织匀浆机 5.5 高速冷冻离心机 5.6 涡旋混合器 5.7 超声清洗仪 6 试样的制备与保存 6.1 试料的制备 取适量新鲜或解冻的空白或供试组织，绞碎，并使均质。 ——取均质后的供试样品，作为供试试料。 ——取均质后的空白样品，作为空白试料。 ——取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。 6.2 试料的保存 -20℃以下保存。 7 测定步骤 7.1 提取 称取试料2g±0.01g，于50mL离心管中，加乙腈20mL，350r/min振荡10min，超声10min，10000r/min离心5min，取上清液，备用。 7.2 稀释 精密量取提取液50μL，加入稀释液950μL，混匀，经0.2μm滤膜过滤，供液相色谱-串联质谱测定。 7.3 基质匹配标准曲线的制备 取6份空白样品，经提取后加入适量的莫奈太尔砜标准工作液，配制系列基质匹配标准溶液，对应样品添加浓度分别为50、100、500、1000、2000、5000μg/kg，然后按照7.2进行稀释，经0.2μm滤膜过滤，供液相色谱-串联质谱测定。以测得的莫奈太尔砜特征离子峰面积为纵坐标，对应的基质匹配标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。求线性回归方程和相关系数。 7.4 测定 7.4.1色谱参考条件 色谱柱：BEH RP18（2.1×50 mm, 1.7 μm），或相当者。 流动相：A相为水；B相为甲醇:乙腈（50∶50，v/v）溶液。 流速：0.3mL/min。 柱温：35℃。 进样量：10µL。 梯度洗脱：梯度洗脱程序见表1。 表1 梯度洗脱条件 时间（min） 流速（mL/min） 流动相A（%） 流动相B（%） 0 0.3 85 15 0.2 0.3 85 15 1.5 0.3 0 100 2.0 0.3 0 100 2.1 0.3 85 15 4.0 0.3 85 15 7.4.2 质谱参考条件 离子源：电喷雾离子源。 扫描方式：负离子扫描。 检测方式：多反应监测。 电离电压：3.0kV。 源温：100℃。 雾化温度：300℃。 锥孔气流速：25L/h。 雾化气流速：650L/h。 测试药物定性、定量离子对及对应的锥孔电压、碰撞能量见表2。 表2 莫奈太尔砜的定性、定量离子对及锥孔电压、碰撞能量参考值 药物 定性离子对（m/z） 定量离子对（m/z） 锥孔电压（V） 碰撞能量（eV） 莫奈太尔砜 503.9 > 166.1 503.9 > 186.1 22 28 503.9 > 186.1 22 7.5 测定法 7.5.1 定性测定 通过试样色谱图的保留时间与基质匹配标准溶液的保留时间、各色谱峰的特征离子与基质匹配标准溶液色谱峰的特征离子相对照定性。试样与基质匹配标准溶液的保留时间的相对偏差不大于2.5%；试样特征离子的相对丰度与基质匹配标准溶液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表3的规定，则可判断试样中存在相应的被测物。 表3 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 >50% >20%至50% >10%至20% ≤10% 允许的相对偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 7.5.2 定量测定 取试样溶液和相应的基质匹配标准溶液，按外标法定量，基质匹配标准溶液及试样溶液中的莫奈太尔砜的响应值均应在仪器检测的线性范围内。对于超过标准曲线最高点浓度的试料，进行适当稀释后定量测定。 7.6 空白试验 除不加试料外，采用完全相同的步骤进行平行操作。 8 结果计算和表述 绵羊可食性组织中莫奈太尔砜的残留量按下式计算： 单点校准： 或标准曲线校准：由As=a Cs +b, 求得a和b，则 式中： X——试料中莫奈太尔砜的残留量，μg/kg； A——试样溶液中莫奈太尔砜的峰面积； Cs——基质匹配标准溶液中莫奈太尔砜的浓度，μg/L； C——试样溶液中莫奈太尔砜的浓度，μg/L； As——基质匹配标准溶液中莫奈太尔砜的峰面积； V——最终定容体积，mL； M——称样量，g； f——稀释倍数。 注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。 9 检测方法灵敏度、准确度和精密度 9.1 灵敏度 本方法在绵羊肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中的定量限均为100µg/kg。 9.2 准确度 本方法中绵羊肌肉、肝脏、肾脏和脂肪在100～26000µg/kg添加浓度水平上的回收率为70%～110%。 9.3 精密度 本方法批内相对标准偏差≤20%，批间相对标准偏差≤20%。 附录A （资料性附录） 莫奈太尔砜对照品信息 莫奈太尔砜 CAS 851976-52-8 分子式 C20H13F6N3O4S 分子量 505.39 纯度 ≥98.8% 标记丰度 / 结构式 附录B 色谱图 图A1.1 绵羊空白肝脏组织溶液特征离子质量色谱图 图A1.2 绵羊肝脏基质匹配标准溶液特征离子质量色谱图（100μg/kg） 图A1.3绵羊空白肝脏添加样品溶液特征离子质量色谱图（100μg/kg） 附件5 泼尼松龙每日允许摄入量（ADI）、最高残留限量标准（MRLs）（试行）和克拉维酸、泼尼松龙残留检测方法标准（试行） 申报单位参照欧盟有关标准制定了泼尼松龙的每日允许摄入量（ADI）和泼尼松龙在牛组织及牛奶中的最高残留限量（MRLs），如下表： 活性成分 残留 标志物 动物 品种 靶组织 MRLs 泼尼松龙 ADI： 0～0.2μg/kg b.w./d 泼尼松龙 牛 肌肉 4μg•kg-1 脂肪 4μg•kg-1 肝脏 10μg•kg-1 肾脏 10μg•kg-1 牛奶 6μg•kg-1 动物性食品中克拉维酸残留量的测定 液相色谱－串联质谱法 1 范围 本标准规定了牛可食性组织及牛奶中克拉维酸的制样和高效液相—串联质谱测定方法。 本标准适用于牛肌肉、脂肪、肝脏、肾脏及牛奶中克拉维酸残留量的检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 1.1-2000 标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法 3 原理 试样中残留的克拉维酸经乙酸铵缓冲液和乙腈提取，提取液再经二氯甲烷反提，正己烷除脂；牛奶试样采用乙醇沉淀蛋白，上清液旋转蒸发近干后用乙酸铵缓冲液复溶。液相色谱-ESI-四级杆串联质谱法测定，外标法定量。 4 试剂和材料 以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。 4.1 试剂 4.1.1 甲酸：色谱纯。 4.1.2 乙腈：色谱纯。 4.1.3 乙醇 4.1.4 正己烷 4.1.5 乙酸铵 4.1.6 二氯甲烷 4.1.7 冰醋酸 4.2 溶液配制 4.2.1 0.01mol/L乙酸铵缓冲液：取乙酸铵0.154g，用水溶解并稀释至200mL，用冰醋酸调节pH值至6.05，混匀。现配现用。 4.2.2 90%乙腈溶液：取乙腈90mL，用水稀释至100mL，混匀。 4.2.3 0.1%甲酸溶液：取甲酸1mL，用水稀释至1L，混匀。 4.3 对照品 4.3.1 克拉维酸对照品：含量≥94.9%。 4.4 标准溶液配制 4.4.1 500μg/mL克拉维酸标准贮备液：精密称取相当于克拉维酸5mg的克拉维酸对照品，于10mL量瓶中，用90%乙腈溶液稀释并定容至刻度，配制成浓度为500μg/mL的克拉维酸标准贮备液。-20℃以下保存，有效期7天。 4.4.2 50μg/mL克拉维酸标准工作液：精密量取500μg/mL克拉维酸标准贮备液1mL，于10mL量瓶中，用0.01mol/L乙酸铵缓冲液稀释并稀释至刻度，配制成浓度为50μg/mL的克拉维酸标准工作液。-20℃以下保存，有效期7天。 4.4.3 克拉维酸标准曲线工作液：精密量取50μg/mL克拉维酸标准工作液适量，用0.01mol/L乙酸铵缓冲液稀释成浓度为30、50、100、200、500、1000、5000μg/L和100、200、500、1000、2000、4000μg/L的克拉维酸标准曲线工作液。现配现用。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。 5.2 分析天平。 5.3 电子天平。 5.4 组织匀浆器。 5.5 旋涡混合器。 5.6 多功能振荡器。 5.7 高速冷冻离心机。 5.8 pH计。 5.9 旋转蒸发仪。 5.10 鸡心瓶。 5.11 移液器：10～100μL、20～200μL、100～1000μL、500～5000μL。 5.12 尼龙微孔滤膜：0.22µm。 6 试样的制备与保存 试样的制备 6.1.1 肌肉、脂肪、肝脏和肾脏 取适量新鲜或解冻的空白或供试组织，绞碎，并使均质。 ——取均质的供试样品，作为供试试样。 ——取均质的空白样品，作为空白试样。 ——取均质的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试样。 6.1.2 牛奶 取适量新鲜或解冻的空白或供试牛奶样品，混合均匀。 ——取均质的供试样品，作为供试试样。 ——取均质的空白样品，作为空白试样。 ——取均质的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试样。 试样的保存 -20℃以下保存。 7 测定步骤 7.1 提取 7.1.1 肌肉、脂肪、肝脏和肾脏 取试样5g（准确至±0.05g），置50mL离心管中，加入0.01mol/L乙酸铵缓冲液15mL和乙腈15mL，涡旋30s，300r/min振荡10min，于4℃，10000r/min离心10min；取上清液转移至50mL离心管中，加二氯甲烷15mL，涡旋30s，于4℃，6000r/min离心5min；转移上层水相至20mL量瓶中，0.01mol/L乙酸铵缓冲液定容至20mL，涡旋混匀备用。 7.1.2 牛奶 取试样10g（准确至±0.10 g），置100mL离心管中，加乙醇40mL，涡旋1min，于4℃，9000r/min离心10min，取上清液转移至鸡心瓶中，于35℃旋转蒸发至0.5mL，立刻加0.01mol/L乙酸铵缓冲液5mL，涡旋15s，溶液转移至10mL量瓶中，0.01mol/L乙酸铵缓冲液定容至10mL，涡旋混匀备用。 7.2 净化 取备用液1.0mL于2mL离心管中，加正己烷0.8mL，涡旋1min，于4℃，13000r/min离心10min，弃正己烷，再重复此操作两次，剩余水相清液于4℃，15000r/min离心10min，取上清液过尼龙微孔滤膜后，供液相色谱-串联质谱测定。 7.3 基质匹配标准曲线的制备 分别取空白试样若干份，按7.1和7.2操作步骤，得到空白基质。取标准曲线工作液适量，空白基质稀释，制备出基质匹配系列标准溶液。肌肉、肝脏、肾脏、脂肪组织试样制备出3、5、10、20、50、100、500μg/L的基质匹配系列标准溶液，牛奶试样制备出10、20、50、100、200、400μg/L的基质匹配系列标准溶液。按7.4进行LC-MS/MS测定，以测得的克拉维酸特征离子质量色谱峰面积为纵坐标，对应的基质匹配标准溶液浓度为横坐标，绘制基质匹配标准曲线。求线性回归方程和相关系数。 7.4 测定 7.4.1 液相色谱参考条件 色谱柱：C8（2.0 mm ×150 mm, 5μm），或相当者； 柱温：35℃； 进样量：5µL； 流动相：A相为0.1%甲酸溶液，B相为乙腈； 梯度洗脱：梯度洗脱程序见表1。 表1梯度洗脱程序 时间 （min） 流速 （mL/min） A （%） B （%） 0.00 0.25 95.0 5.0 2.00 0.25 95.0 5.0 3.50 0.25 20.0 80.0 7.50 0.25 20.0 80.0 7.70 0.25 95.0 5.0 12.00 0.25 95.0 5.0 7.4.2 质谱参考条件离子源：电喷雾离子源； 扫描方式：负离子扫描； 检测方式：多反应监测； 电离电压：-4kV； 源温：500℃； 雾化气压力：60psi； 辅助气压力：60psi； 气帘气压力：40psi； 克拉维酸定性、定量离子对及对应的电压、碰撞能量见表2。 表2 克拉维酸定性、定量离子对及对应的电压、碰撞能量 化合物 定性离子对 （m/z） 定量离子对 （m/z） 去簇电压 （V） 射入电压 （V） 碰撞室射出电压（V） 碰撞能量 （eV） 克拉维酸 197.9>107.9 197.9>135.8 -70 -10 -7 -11 197.9>135.8 -10 7.4.3 测定法 7.4.3.1 定性测定 被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同试验条件下，样品中待测物质的保留时间与混合基质标准溶液中对应物质的保留时间偏差在±2.5%之内，且样品谱图中各定性离子的相对离子丰度与浓度接近的混合基质标准溶液图谱中对应的定性离子的相对离子丰度一致，相对丰度偏差满足表3的规定，则可判断样品中存在对应的被测物。 表3 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 ＞50% ＞20%至50% ＞10%至20% ≤10% 允许的最大偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 7.4.3.2 定量测定 取试样溶液和相应的基质匹配标准溶液，作单点或标准曲线校准，外标法计算。试样溶液和基质匹配标准溶液中克拉维酸的特征离子质量色谱峰面积均应在仪器检测的线性范围之内。当试样溶液测试超出线性范围时，用0.01mol/L乙酸铵缓冲液稀释至线性范围之内，并选择单点法校准。在上述条件下，基质匹配的标准溶液和试样溶液做相同倍的稀释。牛肝脏基质匹配标准溶液、空白和空白添加试样溶液的特征离子质量色谱图见附录图A.1～图A.3。 7.5 空白试验 除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。 8 结果计算和表述 8.1 标准曲线校准 将标准曲线的浓度和对应峰面积进行回归分析，然后按下式计算。 式中： X——试样中克拉维酸残留量，mg/kg； A——试样溶液中克拉维酸的色谱峰面积； b——标准曲线回归方程中截距； a——标准曲线回归方程中斜率； m——供试试样质量，g； V——供试试样处理中间定容的体积，mL。 8.2 单点校准 按下式计算供试组织中被测组分残留量： 式中： Xi——供试试样中克拉维酸的残留量，mg/kg； Cs——基质匹配标准溶液中对应克拉维酸的浓度，ng/mL； Ai——供试试样处理后试样溶液中克拉维酸的色谱峰面积； As——基质匹配标准溶液中对应克拉维酸的色谱峰面积； m——供试试样质量，g； V——供试试样处理中间定容的体积，mL。 注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。 9 检测方法的灵敏度、准确度和精密度 9.1 灵敏度 本方法在牛肌肉、脂肪、肝脏、肾脏组织和牛奶中检测限为10µg/kg，定量限为20µg/kg。 9.2 准确度 本方法在牛肌肉、脂肪、肝脏、肾脏组织和牛奶在20µg/kg～800µg/kg添加水平上的回收率为70%～110%。 9.3 精密度 本方法的批内相对标准偏差≤20%，批间相对标准偏差≤20%。 附录 A （资料性附录） 图A.1 牛肝脏基质匹配标准溶液（500μg/L）特征离子质量色谱图 图A.2 牛肝脏组织空白试样特征离子质量色谱图 图A.3 牛肝脏组织空白添加试样（200μg/kg）特征离子质量色谱图 牛肾脏和脂肪中泼尼松龙残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 1 范围 本标准规定了牛肾脏和脂肪中泼尼松龙残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱检测方法。 本标准适用于牛的肾脏、脂肪组织中泼尼松龙残留量的检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 1.1-2009 标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法 3 原理 试样中残留的泼尼松龙用乙酸乙酯提取，固相萃取柱净化，高效液相色谱-串联质谱法测定，以内标法定量。 4 试剂和材料 以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。 4.1 试剂 4.1.1 甲醇：色谱纯。 4.1.2 乙腈：色谱纯。 4.1.3 乙酸乙酯：色谱纯。 4.1.4 正己烷：色谱纯。 4.1.5 甲酸：色谱纯。 4.1.6 丙酮：色谱纯。 4.2 对照品 4.2.1 泼尼松龙对照品：纯度≥99.5%。 4.2.2 泼尼松龙-D8对照品：纯度≥97.7%。 4.3 溶液配制 4.3.1 20%乙腈溶液：取乙腈20mL，加水稀释至100mL。 4.3.2 0.1%甲酸溶液：量取1mL甲酸，加水定容至1L。 4.3.3 0.1%甲酸乙腈溶液：量取1mL甲酸，加乙腈定容至1L。 4.4 标准溶液配制 4.4.1 泼尼松龙标准贮备液（1mg/mL）：精密称取相当于泼尼松龙10mg的泼尼松龙对照品，于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成浓度为1mg/mL的泼尼松龙标准贮备液。-20℃避光保存，有效期2个月。 4.4.2 泼尼松龙标准中间液（10μg/mL）：精密量取1mg/mL泼尼松龙标准贮备液0.1mL，于10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制成浓度为10μg/mL的泼尼松龙标准中间液。-20℃避光保存，有效期2个月。 4.4.3 泼尼松龙标准工作液（1μg/mL）：精密量取10μg/mL泼尼松龙标准中间液1mL，于10mL容量瓶中，用20%乙腈溶液稀释至刻度，配制成浓度为1μg/mL的泼尼松龙标准工作液。-20℃避光保存，有效期2个月。 4.4.4 泼尼松龙-D8标准贮备液（1mg/mL）：精密称取相当于泼尼松龙-D810mg的泼尼松龙-D8对照品，于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成浓度为1mg/mL的标准贮备液。-20℃避光保存，有效期2个月。 4.4.5 泼尼松龙-D8标准中间液（10μg/mL）：精密量取1mg/mL泼尼松龙-D8标准贮备液0.1mL，于10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制成浓度为10μg/mL的泼尼松龙-D8标准中间液。-20℃避光保存，有效期2个月。 4.4.6 泼尼松龙-D8标准工作液（1μg/mL）：精密量取10μg/mL泼尼松龙-D8标准中间液1mL，于10mL容量瓶中，用20%乙腈溶液稀释至刻度，配制成浓度为1μg/mL的泼尼松龙-D8标准工作液。-20℃避光保存。 4.4.7 系列标准溶液的配制：分别精密量取0.02mL、0.05mL、0.1mL、0.2mL、0.5mL、1.0mL泼尼松龙标准工作液和0.2mL泼尼松龙-D8标准工作液于10mL容量瓶中，用20%乙腈溶液定容至刻度，制备成浓度为2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的标准溶液，内标泼尼松龙-D8浓度均为20ng/mL。现配现用。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。 5.2 分析天平：感量 0.00001g。 5.3天平：感量 0.01g。 5.4 均质机。 5.5 涡旋混合器。 5.6 高速冷冻离心机。 5.7 多功能振荡器。 5.8 氮吹仪。 5.9 微孔滤膜：0.22μm，有机相。 5.10 固相萃取柱：Waters，Sep-Pak, Silica SPE，500mg/6mL或相当者。 6 试样的制备与保存 6.1 试料的制备 取适量新鲜或解冻的空白或供试组织，绞碎，并使均质。 ——取均质的供试样品，作为供试试料。 ——取均质的空白样品，作为空白试料。 ——取均质的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。 6.2 试料的保存 -20℃以下保存。 7 测定步骤 7.1 提取 称取组织样品2g（精确至0.01g）置于50mL离心管中，加入1μg/mL的泼尼松龙-D8标准工作液20µL，涡旋30s，静置5min。加入乙酸乙酯10mL，涡旋震荡10min，于4℃，8000r/min离心10min，移取上清液至另一50mL离心管中。于残渣中再加入乙酸乙酯10mL，按以上步骤重复提取一次，合并两次上清液，于40℃下氮气吹至近干。加乙酸乙酯1mL和正己烷5mL溶解残渣，待净化。 7.2 净化 用正己烷6mL活化固相萃取柱，将待净化液过柱。用正己烷6mL淋洗萃取柱，抽干，用正己烷-丙酮溶液（6∶4，V/V）6mL洗脱，洗脱液于40℃下氮气吹干，用20%乙腈溶液1mL溶解残渣，涡旋1min，超声2min，4℃、10000r/min离心10min。取上清液，用0.22μm滤膜过滤，供液相色谱-串联质谱仪分析。 7.3基质匹配标准曲线的制备 取空白组织样品，按照7.1~7.2进行提取净化后，用系列标准溶液1mL复溶，涡旋1min，超声2min，4℃、10000r/min离心10min，取上清液过0.22μm滤膜，即得浓度为2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的基质匹配标准溶液。以泼尼松龙特征离子的质量色谱峰面积与内标特征离子的质量色谱峰面积的比值为纵坐标，以对应的基质匹配标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。求线性回归方程和相关系数。 7.4 测定 7.4.1 高效液相色谱参考条件 色谱柱：C18色谱柱（2.1×50mm，1.7μm），或相当者； 流动相：0.1%甲酸乙腈+0.1%甲酸水（25∶75，v/v）； 柱温：40℃； 进样量：10µL； 流速：0.3mL/min。 7.4.2 质谱参考条件 离子化模式：ESI，正离子扫描； 扫描模式：多反应监测（MRM）； 碰撞气：氩气； 加热气：氮气，10L/min； 雾化气：氮气，3L/min； 干燥气：氮气，10L/min； 接口温度：300℃； DL 温度：200℃； 加热模块温度：400℃； 喷雾针位置：+2mm； 测定药物定性、定量离子对及对应的偏转电压、碰撞能量见表1。 表1 泼尼松龙和内标泼尼松龙-D8的定性、定量离子对及对应的偏转电压、碰撞能量 化合物 定性离子对 （m/z） 定量离子对 （m/z） Q1 偏转电压 碰撞能量 Q3 偏转电压 泼尼松龙 361.4＞343.3 361.4＞343.3 -11 -10 -23 361.4＞147.5 -10 -27 -26 泼尼松龙-D8 369.3＞351.3 369.3＞351.3 -18 -12 -17 7.4.3 测定法 7.4.3.1 定性测定 在相同测试条件下，试样液中泼尼松龙的保留时间与标准溶液中相应物质的保留时间，偏差在±5%以内；且检测到的特征离子的相对丰度，应当与标准溶液相对离子丰度一致。其允许偏差应符合表2的规定，则可判断样品中存在对应的被测物。 表2 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 ﹥50% ﹥20%至50% ﹥10%至20% ≤10% 允许的最大偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 7.4.3.2 定量测定 取试样溶液和相应的基质匹配标准溶液，作单点或基质匹配标准曲线校准。按内标法，以泼尼松龙和泼尼松龙-D8定量离子峰面积的比值进行定量。试样溶液中的泼尼松龙响应值应在仪器检测的线性范围内。牛肾脏基质匹配标准溶液、空白试样和空白添加试样特征离子质量色谱图见附录图A.1～图A.3。 7.5 空白试验 除不加试料外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。 8 结果计算和表述 试样中泼尼松龙的残留量按下式计算： 单点校准： …………………………………………………（1） 或基质匹配标准曲线校准，由 …………………………………（2） 求得a和b，则 ………………………………………………（3） 按下式计算试样中泼尼松龙的残留量 …………………………………………………………（4） 式中： X —— 试样中泼尼松龙的残留量，μg/kg； Ci—— 试样溶液中泼尼松龙的浓度，ng/mL； Cis—— 试样溶液中泼尼松龙-D8的浓度，ng/mL； Cs—— 基质匹配标准溶液中泼尼松龙的浓度，ng/mL； Cis’—— 基质匹配标准溶液中泼尼松龙-D8的浓度，ng/mL； Ai —— 试样溶液中泼尼松龙的峰面积； Ais —— 试样溶液中泼尼松龙-D8的峰面积； As—— 基质匹配标准溶液中泼尼松龙的峰面积； Ais’—— 基质匹配标准溶液中泼尼松龙-D8的峰面积； V —— 溶解残余物所得的试样溶液体积，mL； m —— 供试试样质量，g。 注：计算结果需扣除空白值。测定结果用两次平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。 9 检测方法灵敏度、准确度与精密度 9.1 灵敏度 泼尼松龙在牛肾脏和脂肪中的检测限为1µg/kg，定量限为2µg/kg。 9.2 准确度 本方法在牛肾脏和脂肪中，2μg/kg～20μg/kg添加浓度水平上的回收率均为70%～120%。 9.3 精密度 本方法批内相对标准偏差≤20%，批间相对标准偏差≤20%。 附录 A （资料性附录） 图A.1 牛肾脏基质匹配标准溶液（2ng/ml）特征离子质量色谱图 图A.2 牛肾脏组织空白试样特征离子质量色谱图 图A.3 牛肾脏组织空白添加试样（2μg/kg）特征离子质量色谱图 收藏（0）